[전염병학] 돼지 패혈증 원인체 진단

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소개글
[전염병학] 돼지 패혈증 원인체 진단에 대한 자료입니다.
목차
1. Introduction

2. Material and Method

Step 1. Bacterial pure culture

(1) First inoculation to MacConkey agar and Blood agar

(2) Second inoculation to MacConkey agar and Blood agar

(3) Pure bacterial culture

Step 2. Biochemical test

(1) Gram staining

(2) Vitek

(3) Antibiotics susceptibility test

1) Drug diffustion test :

2) Kirby-Bauer Susceptibility test

3) Tube dilution assay

3. Results

4. Discussion

(1) 결과 해석

(2) 원인균 조사

1)salmonella typimurium

2) E.coli

3) Streptococcus suis

(3) 원인균 subtype 분리동정법

1) Salmonella Subtype 분리 동정법

① 혈청응집반응을 통한 혈청학적 분리 동정법

② Salmonella의 mRNA를 분석하는 Microarray

2) E.coli typing

(4) 치료와 예방

1) Salmonella

2) E.coli

3) Streptococcus suis

4. Reference

본문내용

2) 원리

Gram positive bacteria와 Gram negative bacteria는 cell membrane의 구성에 큰 차이가 있다. 그 중 Gram staining에 영향을 주는 peptidoglycan층의 두께가 Gram positive bacteria가 훨씬 두꺼워 위의 Gram staining 단계에서 crytal violet-iodine의 decolorization이 일어나지 못해 Gram +는 purple, Gram -는 red을 띄게 된다.

But, 오래된 세포나 endospore를 형성하는 세균에서는 예외인 경우도 있다. 예를 들어, Bacillus spp.(Gram +)의 경우 일반적으로 거의 모든 세포들이 탈색 과정 중에 색이 빠져나가며, Endospore는 염색되지 않은 부분으로 보인다. 따라서 호기 상태에서 endospore의 형성은 Bacillus spp., 혐기 상태에서는 Clostridium spp.임을 암시한다.

3) 이외의 Gram+, Gram- bacteria를 구별하는 방법
a. LANA test : L-alanine-4-nitroanilide에 습윤 시킨 면봉으로 colony를 문질렀을 때 면 봉이 노란색으로 변하면 Gram-, 변화가 없으면 Gram+bacteria이다.
b. KOH test : Non-selective medium(blood agar)에서 배양된 균을 picking하여 깨끗한 slide위에 옮긴 후 동량의 3% KOH을 떨어뜨린 후 60초 후에 loop로 균의 상태를 확인해 봤을 때 viscous gel을 형성하면 Gram-, gel을 형성하지 않 으면 Gram+ bacteria이다.
c. Susceptibility to Vancomycin : 일부 Lactobacilli를 제외한 대부분의 Gram +는 Vancomycin에 감수성을 보이나, Gram-는 저항성을 보인다.
d. Growth or none-growth on MacConkey agar
상업적으로 다양한 종류의 MacConkey agar가 시판되고 있다. Bile-salt의 양을 달리하거나 crystal violet를 첨가 또는 첨가하지 않아 다양한 용도로 사용하나, 대부분의 Gram+는 MacConkey에서 자라지 못한다.

(2) Vitek

a. Pure culture
b. Identification of Gram reaction : 사용할 카드를 선별하기 위해(GN or GP card)
c. Dilution of bacteria : test에 사용하기 적절한 탁도로 균을 희석
멸균된 유리관에 0.45% saline을 3ml씩 분주한 후 멸균된 면봉을 이용하여 colony를
picking하여 유리관 내 saline에 희석한다. 이 후 spectrophotometer를 이용하여 0.6McF(0.53~0.63)에 맞춘다.
d. Filling and loading the card

참고문헌
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2) http://www1.knrda.go.kr/jinhae/chuck744.htm
3) http://www.wjatc.go.kr (원주시 농업기술센터)
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20) http://www.nvrqs.go.kr/Ex_Work/Disease_information/
21) http://www.asp2000.co.kr/technote/read.cgi?board=sildata2&nnew=2&y_number=8