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Immobilization of Chitinase Produced from Lysobacter enzymogenes MG18S on Chitosan Beads
분야 자연과학 > 생물
저자 ( Young Hwan Jang ) , ( Dong Jun Seo ) , ( Kil Yong Kim ) , ( Ro Dong Park ) , ( Woo Jin Jung )
발행기관 한국키틴키토산학회
간행물정보 한국키틴키토산학회지 2012년, 제17권 제3호, 129~134쪽(총6쪽)
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영문초록
Chitosan beads were prepared by cross-linking with glutaraldehyde and used for the immobilization of crude enzyme produced by the chitinase-producing bacterium Lysobacter enzymogenes MG18S. The optimal process for immobilization was as follows: a 10 mL volume of wet 2.5% chitosan beads was added to tubes containing 10mL 0.1 M phosphate buffer (pH 7.04) in a 5% solution of glutaraldehyde (GA). Then, 1mL of enzyme solution (238ug/mL) containing 0.1 M phosphate buffer (pH 6.45) was added to 1mL of glutaraldehyde treated wet chitosan beads (20 beads). Chitinase activities of 2.5% chitosan beads with GA 0% and GA 5% were 41.2 and 6.5 units/mg protein, respectively, at 2 h of reaction using hyphae of R. solani KACC 40151 as the substrate. The relative activity of 2.5% chitosan beads with GA 0% decreased with processing time during a 6 h period, while the activity of 2.5% chitosan beads with GA 5% was maintained until 4 h, and then decreased at 6 h after initiation of the reaction. Chitinase activities of 2% and 7% chitosan beads with GA 0% were 89.2 and 110.5 units/mg protein, respectively, at 2 h of reaction time. The relative activity of 2% chitosan beads rapidly decreased at GA 1% after reaction for 2 h, while that of 7% chitosan beads slowly decreased with increasing concentrations of glutaraldehyde. Concerning the operational stability of the immobilized enzyme, chitinase activities of 7% chitosan beads with GA 0% and 10% were 45.4 and 2.1 units/mg protein, respectively, at 2 h of reaction time using colloidal chitin as a substrate. The chitinase activities of 7% chitosan beads with GA 0% and GA 10% were 1.3 and 0.3 units/mg protein, respectively, at 20 h of reaction time. These results indicate that immobilization of enzyme on chitosan beads will be an effective method for the prevention and biological control of phytopathogens in the field.
 
 
Chitinase, Immobilization, Chitosan, Lysobacter enzymogenes MG18S, Biocontrol
 
 
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