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Raw 264.7 세포에서 섬바디나물 추출물의 iNOS, COX-2 단백질 및 mRNA 발현 억제 효과
분야 자연과학 > 생물
저자 이진영 ( Jin-young Lee ) , 유단희 ( Dan-hee Yoo ) , 주다혜 ( Da-hye Joo ) , 채정우 ( Jung-woo Chae )
발행기관 한국미생물생명공학회(구 한국산업미생물학회)
간행물정보 한국미생물·생명공학회지 2016년, 제44권 제4호, 571~576쪽(총6쪽)
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국문초록
본 연구에서는 섬바디 나물의 항염증 효과를 알아보기 위하여 LPS로 염증을 유도한 Raw 264.7 세포에 대한 섬바디 나물 80% 에탄올 추출물의 효과를 살펴보았다. 섬바디 나물 추출물을 LPS로 유도된 Raw 264.7 대식세포에서 전염증성 인자(iNOS, COX-2)들을 생성하여 측정하였다. 섬바디 나물 추출물의 대식세포에서의 세포 독성 측정을 MTT를 수행하였다. 섬바디 나물 추출물의 세포 독성을 측정한 결과, 1,000 μg/ml의 농도에서 100% 이상의 세포 생존율을 보였다. 섬바디 나물 추출물의 50, 100, 500 μg/ml 농도에서 iNOS와 COX-2의 단백질 발현 억제 효과를 측정하기 위해 western blot을 통해 측정하였고, 양성대조군으로는 β-actin을 사용하였다. 그 결과, 섬바디 나물 추출물을 western blot을 통해 측정한 iNOS, COX-2의 단백질 발현 억제 효과는 500 μg/ml 농도에서 각각 56%, 61.6%로 감소하였다. 섬바디 나물 추출물의 50, 100, 500 μg/ml 농도에서 iNOS, COX-2의 mRNA의 발현억제 효과를 측정하기 위해 RT-PCR을 통해 측정하였으며, 양성 대조군으로 GAPDH를 사용하였다. 그 결과, 섬바디 나물 추출물을 RT-PCR을 통해 iNOS, COX-2의 mRNA 발현 억제 효과를 측정한 결과는 500 μg/ml에서 각각 77.9%, 83.3%로 감소하였다. 이를 통해, 섬바디 나물 추출물은 염증을 억제시켜 주는 가능성이 있는 항염증 물질로써의 효과가 있을 것으로 보여진다.
 
 
영문초록
In this study, the anti-inflammatory activities of the 80% ethanol extract of Dystaenia takeshimana (DT) were investigated using Raw 264.7 cells treated with lipopolysaccharide (LPS). The effect of DT extract on the production of pro-inflammatory factors (iNOS, COX-2) in LPS-stimulated Raw 264.7 macrophages was examined. The cytotoxic effect of DT extract on macrophage cells (Raw 264.7) was examined by the 3-[4, 5- dimethyl-thiazol-2-yl]-2, 5-diphenyl-tetrazoliumbromide (MTT) assay. Treatment with DT extract showed 100% or more cell viability at the concentration 1,000 μg/ml. The inhibitory effect of DT extract on protein expression of inducible NOS (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) was measured by western blotting using the concentrations 50, 100, and 500 μg/ml, with β-actin used as the positive control. Consequently, the protein expression of iNOS, and COX-2 as observed by western blotting, was decreased by 56%, 61.6%, respectively with 500 μg/ml DT extract. Inhibition of iNOS and COX-2 mRNA expression was measured by reverse transcription- polymerase chain reaction (PCR) using DT extract concentrations 50, 100, and 500 μg/ml, with GAPDH used as a positive control. Consequently, the mRNA expression of iNOS and COX-2 as observed by reverse-transcription-PCR was decreased by 77.9% and 83.3%, respectively at 500 μg/ml concentration of DT extract. In conclusion, DT extract may affect inflammatory factors as a potential anti-inflammatory agent.
 
 
Dystaenia takeshimana extract, anti-inflammatory, iNOS, COX-2
 
 
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