청상방풍탕 열수 추출물의 피부재생, 주름개선, 미백, 보습 효과 및 세포독성 평가
분야- 의약학 > 기초한의학
- 저자
- 우창윤 ( Chang-yoon Woo ) , 김동철 ( Dong-chul Kim )
- 발행기관
- 대한한방부인과학회
- 간행물정보
- 대한한방부인과학회지 2017년, 제30권 제2호, 49~70페이지(총22페이지)
- 파일형식
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방 법: 본 연구에서는 human normal fibroblast(CRL-2076) 세포 및 B16/F10 murine melanoma(CRL-6475) 세포에 대한 청상방풍탕 열수 추출 동결건조물(수율 18.71%)의 세포독성을 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium Bromide) 방법을 통해 평가하였고, B16/F10 melanoma cells의 melanin 생성 억제 정도 및 melanin 합성 필수 효소인 tyrosinase 활성 억제와 arbutin을 비교 평가하여 미백효과를 평가 하였다. 또한 피부 재생 및 주름 개선 효과를 transforming growth factor(TGF)-β1와 fibroblast의 collagen type I 합성능을 비교, phosphoramidon disodium salt(PP)와 세포 외 기질의 분해에 관여하는 elastase활성 억제를 비교, oleanolic acid(OA)와 hyaluronidase, collagenase 및 matrix metalloproteinase(MMP)-1 활성 억제를 비교하여 각각 평가 하였고, 마우스 피부 수분함량 변화를 관찰하여 보습효과를 평가하였다.
결 과: 본 실험의 결과, 청상방풍탕은 human normal fibroblast 세포 및 B16/F10 murine melanoma 세포에서 최고 농도인 500 mg/ml까지 유의한 세포독성이 나타 나지 않았고, fibroblast의 collagen type I 합성을 증가시켰다. 또한 세포외기질 파 괴와 연관된 것으로 알려진 hyaluronidase, elastase, collagenase 및 MMP-1 활성을 각각 억제하였고 melanin의 생성에 관여하는 tyrosinase의 활성 및 B16/F10 melanoma 세포의 melanin 생성을 농도 의존적으로 차단함이 관찰되었다. 이와 더불어 정상 매체 대조군에 비해 청상방풍탕 경구 투여군이 투여 용량 의존적으로 마우스 피 부 수분 함량을 유의성 있게 증가시켰다.
결 론: 이상의 결과에서, 청상방풍탕은 세포 독성 없이 피부재생, 주름개선, 미 백 및 보습 효과를 나타남이 관찰되어 차후 피부 개선 소재로서 그 가치가 높을 것으로 판단되나 금후 개별 구성 약재 각각에 대한 효능 및 생리활성을 나타내는 화학성분의 검색과 더불어 다양한 방면으로 기전적인 연구와 피부 보호 효과에 대한 in vivo평가를 체계적으로 수행해야 할 것으로 판단된다.
Methods: In the present study, cytotoxicity of CSBPT lyophilized aqueous extracts (yield=18.71%) was experimented against human normal fibroblast cells and B16F10 murine melanoma cells by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium Bromide (MTT) assay, and skin regeneration and anti-wrinkle effects were also showed through the assay of collagen type I synthesis by an enzyme immunoassay (EIA) kit as comparing with transforming growth factor (TGF)-β1, hyaluronidase, collagenase and matrix metalloproteinase (MMP)-1 inhibitory assays as comparing with oleanolic acid (OA), and elastase inhibitory effects as comparing with phosphoramidon disodium salt (PP). In addition, whitening effects of CSBPT were observed by tyrosinase inhibitory assay and melanin formation test in B16/F10 melanoma cells as comparing with arbutin, and skin moisturizing effects were measured through mouse skin water contents test, respectively.
Results: No CSBPT treatment related cytotoxic effects were demonstrated against human normal fibroblast cells and B16/F10 murine melanoma cells. CSBPT concentration-dependent increased collagen type I synthesis at human normal fibroblast cells. It also effectively suspreessed hyaluronidase, collagenase, elastase and MMP-1 activities, which were enzymes that related to declining of ECM and formation of wrinkle. CSBPT supressed B16/F10 melanoma cells`s melanin productions with tyrosinase activity, which was an enzyme connected with melanin formation, and dose-dependent and significant increases of skin water contents were detected in CSBPT treated mouse skin as compared with vehicle control skins.
Conclusions: CSBPT showed favorable and enough skin regeneration, anti-wrinkle, whitening and skin moisturizing effects at least in a condition of this experiment. However, more detail mechanism and in vivo skin protective efficacy studies should be conducted in future with the screening of the biological active compounds in individual herbs of Cheongsangbangpung-tang.
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