분야
hwpMolecular Techniques in Laboratory Diagnosis
of Infectious Diseases
16. Molecular Techniques in Laboratory Diagnosis of Infectious Diseases
１. introduction
－ 미생물 감염
① culture
－ in vitro에서 배양 실패 가능성 존재
- incubation 시간 오래 걸림
② 혈청학적 방법
(EIA,latex agglutinationd, direct and indirect fluorescence antibody test)
－ 민감도가 제한적
- Ａｂ양이 부족
- 빠른 Ａｂ－Ａｇ반응 요구할때가 있음
- 1990년대 : 분자생물학적 방법 ( DNA probe PCR）
2 . Specific Molecular Techniques
2 .1 DAN prbe hybrodization assay
１） 핵산 프로브의 조건
① DNA의 알려진 조각이어야 함
② 방사선 동위원소 또는 화학적으로 labelled 되어야 함
③ label 종류에 따라 검사의 민감도 결정됨
2 ) 2가지 type있음
① membrane hybridization
； target 미생물을 용해시키고 nylon membrane 에 liberated DNA 를 고정시키는 방법
② liquid hybridization
：solid phase에 고정시킬 필요없이 liberated DNA 고정시킬 필요없이 labelled probe에 직접 hybridization 함
３） Hybridization Protection assay（Gen-probe）
① 일상적으로 쓰이는 liquid hybridization
② target 미생물의 rRNA에 특이적인 aridinium ester-labelled DNA probe이용
③ chemiluminescence를 이용하여 aridinium - ester에 의해 방출된 빛의 양을 측정함으 hybridization을 정량
2 .2 Branched DNA ( bDNA ) Signal Amplification
１）bDNA신호 증폭 system
① 정성적이고 정량적임
② multiple probes이용
③ hepatitis B DNA, HIV-RNA, HCV-RNA, CMV DNA를 양 측정하는데 효과적으로 이용되어왔음
