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    PCR Based Mutation Detection

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    • 소개글
    PCR Based Mutation Detection에 대한 자료입니다.
    본문내용
    PCR-Based Mutation Detection
    PCR-Based Mutation Detection
    Hybridization
    Electrophoresis
    PCR
    Hybridization
    DNA 또는 RNA의 특정한 염기서열이 위치하는 부위를 밝히는 방법
    nucleic acid sequence의 특정한 부분이 이에 대응하는 probe와 결합하는 특성을 이용
    Probe
    Radioactively labled probe
    Colorimetric labled probe
    Affecting factors (1)
    Blocking reagents used
    The time of hybridization
    The volume of hybridization solution
    The presence of dextran or other polymer in the hybridization solution
    Affecting factors (2)
    The salt concentration of the hybridization solution
    The solvent concentration of the hybridization solution
    The hybridization temperature
    The washing condition
    Hybridization
    Northern blotting : RNA detection
    Southern blotting : DNA detection
    Western blotting : protein detection
    ASO hybridization
    Allele specific oligonucleotide hybridization
    Southern blotting의 한 방법
    Dot hybridization
    : 전체 DNA를 전기영동없이 이전 후 oligonucleotide probe 사용 결합
    ASO hybridization
    Point mutation까지도 검출할 수 있는 간단하고 간편한 방법
    제한효소나 전기영동 처리 없이 target DNA를 직접 nitrocellulose membrane에 흡착시켜 probe와 hybridization
    Oilgonucleotide probe
    19-21개 염기쌍으로 합성하고 방사성 동위원소로 표지
    완전히 상보적인 유전자 서열에만 결합
    Electrophoresis
    단백질이나 핵산 등의 고분자물질은 하전을 띄므로 이를 기초로 하여 이들 분자를 전기장을 띤 매질(겔)에서 이동 분리시켜 이들의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 방법
    Electrophoresis
    The net charge on the molecule at the pH at which the assay is conducted
    The size and shape of the molecule
    The electric field strengh
    The pore size of the gel
    Temperature
    Electrophoresis gel
    Agarose gel
    Polyacrylamide gel
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