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소개글
[분자 생물학] DNA Fragmentation Assay에 대한 자료입니다.
목차
Object
Apoptosis cell의 전형적인 특징 중 하나인 DNA의 Fragmentation을 관찰하는 것.
intro
Apoptosis ?
Programmed Cell Death라 불려지는 세포 자살 시스템에
서 능동적인 세포고사 과정을 Apoptosis라고 한다.
Apoptosis의 특징.
apoptosis과정동안 Nucleosome사이가 잘려서 DNA는
분절화 (Fragmentation)되고, 염색질(Chromatin)은
응축(Condensation)된다. 그 다음 핵이 작은 조각들로 잘려져 나가고, 마지막으로는 세포 자체가 오그라들어서 세포고사체(apoptotic body) 라고하는 막으로 둘러싸인 조각들로 쪼개진다.
Methods
1. 5x100.000/ml로 culture한 60m dish의 cell을 15ml tube로
옮기고 500g에서 5분간 centrifuge한다.
2. sup을 버린 다음 pellet을 얻는다 (4℃)
3. pellet + lysis buffer 20㎕를 넣어서 resuspending후에 tube
로 옮긴다.
본문내용
왜 세포가 자살하는가?
apoptosis의 이유는 여러 가지로 꼽힌다.
성인의 경우, 세포 증식의 균형을 유지하며, 세포가 대체될 때 세포의 수를 일정하게 유지하는데 쓰인다.
예) 인체에서는 하루에 5x10¹¹개의 혈액세포가 apoptosis 로 제거된다.
그 외에도 DNA가 Repair할 수 없을 만큼 Damage를
입었을 경우, 잠재적인 돌연변이(예를 들어 암세포 같
은)의 예방차원에서 Cell Death Program이 일어나기도
한다.
하고 싶은 말
학교 실험시간에 발표 자료 입니다.