분야
hwpⅠ바이오의약품(치료용 단백질) 생산과 형질전환조류
Ⅱ조류의 형질 전환 기술
1.표적세포에 외래 유전자를 도입 하는 방법
1) 생물학적으로 도입하는 방법
(1) Retrovirus(ex:조류 백혈병 바이러스 등) vector system을 이용하는 방법
(2) Lentivirus vector system을 이용한 방법
(3)전이인자(transposable element)를 이용하는 방법
2) 물리적학적으로 도입하는 방법
(1)전기천공법
(2)미세주입법
3) 화학적으로 도입하는 방법
(1)리포좀법
(2) 인산칼슘을 매개로 한 형질감염법
2.조류의 형질전환 방법
1) 1세포기 수정란 미세주입법
2) 줄기세포를 이용한 형질전환 조류의 생산
① 배반엽세포로부터 유래하는 배아줄기세포(ESCs:Embryonic Stem Cells)를 이용하는 방법
② 원시생식세포(PGCs:Primordial Germ Cells)와 원시생식세포로부터 유래하는 배아생식선줄기세포(EGCs:Embryonic Germ Cells)를 이용하는 방법
③ 정원줄기세포(SSCs:Spermatiogonial Stem Cells)와 여기서 유래한 생식선 줄기 세포(GSCs: Germline Stem Cells)를 이용하는 방법
Ⅲ형질전환조류를 통해 만들어진 바이오 신약
Ⅳ참고문헌
3) 화학적으로 도입하는 방법
(1)리포좀법
리포좀은 양친매성 지방산이 구형으로 뭉친 구조로서 물질을 세포 내로 도입하는 기능이 있다. 일반적인 리포좀은 지질 이중층으로 친수성 물질을 안에 담아 세포 내로 도입하지만 DNA 도입에 사용하는 지방산은 +전하를 띠는 양이온 지방산으로 보통 단일층 리포좀을 만든다. 이런 리포좀은 내부에 DNA를 담기보다는 밖에 음전하를 띠는 DNA와 리포좀과 결합하여 복합체를 이루고 이런 복합체는 세포막과 융합하며 DNA를 세포내로 도입하게 된다.
양이온리포좀과 DNA의 복합체
(2) 인산칼슘을 매개로 한 형질감염법
CaCl2와 DNA를 중성의 인산 완충용액에서 섞으면 CaPO4-DNA 복합체가 형성된다. 이 복합체가 세포 표면에 가라앉으면 세포의 내포운동에 의해 침전물이 세포 내로 흡수되어 염색체로 끼어들어 삽입되는 원리를 이용한다.
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