DNA 용액의 농도를 측정하는데 가장 많이 사용되는 방법은 자외선 흡광 광도법이다. 이중나선 DNA의 염기는 260 nm의 파장에서 최대 흡광도를 지니고 있으며, 이 파장에서 DNA의 흡광계수는 E260 = 20이다. 따라서 1 mg/ml의 농도를 지니고 있는 DNA의 흡광도는 A260 = 20이 되며 DNA농도와 A260 값은 정비례 관계에 있
흡광도 A의 측정에 기초한다. 원래, 흡광 분석성분의 농도 c는 다음 식으로 나타내는 것과 같이 흡광도에 선형으로 비례한다:
이식이 Beer법칙의 수학적인 표현이다.
Ⅱ. 본 론
1. 투광도와 흡광도의 측정
분석용액이 어떤 종류의 투명한 용기나 셀에 넣어져 있어야 하기 때문에 투광도와 흡광도
1. 실험 목적
- 각자 채취한 혈액으로부터 DNA 추출 Kit를 사용하여 Genomic DNA를 추출한다.
- Spectrometer(Nano Drop)를 이용하여 추출된 DNA의 Optical Density를 측정하고 이로부터 DNA의 농도를 계산한다.
- DNA의 종류와 DNA 추출 방법을 알아본다.
- 흡광도 측정에 의한 DNA 농도 계산 및 순도측정의 원리를 알아본다.
Ⅴ. Discussion
1) 표준곡선 흡광도 측정 결과
- GOT, GPT 표준곡선을 그리기 위한 흡광도 측정 결과에 오류가 문제가 있다.
- 표준곡선 시액의 농도에 비례하여 흡광도가 증가하여야 하는데 GOT 표준곡선의 경우
0ul에서 0.2410이었으나 10ul에서 0.6640으로 급증한 후에 점차적으로 증가를 하고
▶ 기 기
흡광 광도 법에서 빛의 흡광도를 측정하는 기구를 분광광도계(Spectrophotometer)라 한다.
기기에는 크게 ‘광원, 파장선택장치, Cuvette holder와 sample compartment, 검출기)와 지시기’가 있다.
-분광 광도계의 구조
① 광원(light source) : 시료 중의 흡광물질 농도를 측정하는데 필요한 파장의 빛을 일