acetate EDTA) : DNA 분자량이 큰 경우, agarose electrophorsis에서 쓴다.
TBE(Tris-borate EDTA) : DNA 분자량이 작은 경우, DNA sequencing에 쓰인다.
Procedure
Material & Equipment
Restriction enzymes(BamHI, NdeI), pET-14b, FabG gene이 inserted pET-14b plasmid, DDW , 10 x reaction buffer, 1 x TAE buffer, agarose, DNA ladder, DNA loading buffer
Pipette, binding column, spi
concentration, DNA의 conformation(superhelical DNA > circular DNA > nicked circular DNA), Applied voltage, Intercalating dyes, Electrophoresis buffer의 composition과 ion strength.
(3) 전기영동 완충액(Buffer)
TAE(Tris-acetate EDTA): DNA 분자량이 큰 경우, agarose electrophoresis에서 쓴다.
TBE(Tris-borate EDTA): DNA 분자량이 작은 경우, DNA sequencing에 쓰인다.
template로 쓰는 것의 차이
mRNA는 같은 genomic DNA에서 유래하였다고 해도 splicing방법에 의해 변화된 것도 찾을 수 있다. 또한 각 조직마다의 expression정도를 찾기에도 이용되며, 무 엇 보다 coding sequence만 연결된 구조를 원할 때 쓰인다. 돌연변이를 찾고자 할 때는 굳이 RNA를 template롤 할 필요는 없다. 왜냐하