< ELISA란? > (indirectELISA)
:> Enzyme-linked immuno sorbent assasy(ELISA)는 Enzyme immunoassay(EIA)라고도 불린다. 이는 sample안의 antigen 혹은 antibody를 detection하기 위한 immunology를 사용한 biochemical technique이다. ELISA는 diagnostic tool로 사용되고, plant pathology등 여러 산업에서 사용된다.
효소는 항체분자의 Fc 지역에 공유결합되도록 화학반응을 이용하여 결합시켜 사용한다.
- ELISA는 1970년 이후 많은 변형이 서로 다른 상황에서 개발 되고 사용되어 왔지만 기본적으로 네 가지 동일한 기본 요소 에 따라 달라진다:
① Coating/Capture: direct or indirect immobilization of antigens to the surface of polystyre
10R-1. Microplate에 의한 단백질정량방법을 설명하라.
■Microplate reader는 다양한 colorimetric application에 기본적으로 필요한 장비로, 한번에 하나의 sample값을 측정하는 cuvette type photometer와 달리 well plate단위로 다수의 단백질 정량, ELISA, cell viability / toxicity (MTT assay 등)를 한번에 multidetection mode로 측정할 수 있
<1. 실험 과정 이해>
1. SDS-PAGE: 이번에 사용한 gel은 보다 딱딱하게 만들어진 것이었다. running gel 구성의 농도를 높이면 보다 딱딱해진다. 지금까지의 실험처럼 ...
4. Transfer: transfer를 준비하면서 gel을 장착시키게 되는데, 이 때 겔을 맨 손으로 만지게 되면 손에 있는 수 많은 종류의 protein이 gel에 묻어서