TLC의 장점은 아주 적은 양의 시료라도 분석이 가능하다는 데 있다. 색깔이 있는 물질은 크로마토그램 위의 반점으로 알아보기 쉽지만 무색의 물질일 경우에는 반점의 위치를 확인하기 위해서 발색제를 뿜어준다든가 또는 자외선(UV)을 쬐어서, 형광을 발생하게 하는 등의 수단을 써야 한다.
실험준비
시료가 분리되고 분석되므로 이에 따라 HPLC가 여러 종류로 나누어지며 각각의 HPLC의 원리가 이 컬럼의 특성에 있다고 할 수 있다. 분리관(고정상)의 충진물 특성(순상, 역상, 이온교환 컬럼 등), 충진물의 입자크기, 컬럼의 내경과 길이 등에 의해 분리능도 다양해진다.
우리의 실험에서는 역상컬럼을
실험기구의 형태가 평면인 경우 평면 크로마토그래피이며, 이는 다시 종이 크로마토그래피(paper chromatography, PC)와 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography, TLC)로 나뉜다. 고정상을 포함한 실험기구의 형태가 칼럼인 경우 칼럼 크로마토그래피이다.
이동상이 액체인 경우 액체 크로마토그래피(liquid chro
TLC판을 전개통(왼쪽 그림 참조) 속에 거의 수직 방향으로 세워둔다.전개통 속이 용매의 증기로 포화되도록 작은 전개통을 사용하고, 또 전개통 안쪽 3면에 전개 용매를 충분히 흡수한 거름종이로 휘장을 친다. TLC의 경우에도 이미 확인된 대조 물질을 함께 전개시킨다.
2) TLC를 이용한 실험
(1) 준비물
분석에는 직접 적용할 수 없기 때문에 알코올이나 저분자 유기산 이외의 생물공정에서 얻어지는 생성물을 분리정제 하는 데는 유용하지 않다. 그러나 액체 크로마토그래피는 적당한 용매에 용해되는 비휘발성 물질의 분석에 적합하다. 크로마토그래피는 다성분 혼합시료의 분리와 분석에 특히 유용하