※재조합 DNA를 선별방법이 필요한 이유
: 클로닝의 주요목적 중에서정제기능이 있다. 우리가 벡터를 잘라서 잘라진 공간에 유전자를 넣는데 우리가 원하는 재조합 DNA 분자가 들어가기도 하고 원하는 유전자가 아닌 다른 유전자들도 들어갈 수 있다. 즉, 잘못된 재조합 DNA 분자도 있고 DNA 조각이 들어
비록 항생물질 저항성 유전자가 선택 표시제의 가장 편리한 유형이지만, 일부 플라스미드는 다른 체계를 이용한다. 한 중요한 예는 pUC8 이다. 그것은 앰피실린 저항성 유전자와 lacZ’ 라 불리는 유전자를 운반한다. 그리고 lacZ’ 는 β-갈락토시다아제 효소의 한 부분을 암호화한다. pUC8을 클로닝하는 것
• 실험 준비물 : Ligation 혼합액, Competent cell, LB 용액, 42℃ water bath, Shaking
incubator, LB agar plate (Amp 50μg/ml – final conc)
실험에 사용할 competent cell을 얼음에서 약 15~20분 동안 녹인다.
Competent cell 200 ul를 각각의 DNA 혼합액에 넣어준 후 얼음에 약 30분간 incubation.
혼합액 tube를