loading buffer,
pipette, binding column, spindown centrifuge, Water bath, microwave, Electrophoresis tank, e-tubes, ice box, gel cast, blade, heat block, vortex, table top centrifuge
5. Procedure
1) Digestion of DNA with Restriction Enzyme
① Extracted plasmid와 buffer, DDW를 먼저 섞고 마지막에 제한효소를 넣는다.
Plasmid only or inserted Plasmid 5 μl
식품을 맛있게 조리하면서 영양소 손실은 최소화
조리에 의해 풍미를 살린다.
색, 질감을 조절하여 식욕을 돋운다.
소화가 쉽도록 한다.
위생상 안전한 음식으로 처리한다.
영양소 손실이 최소화 될 수 있는 조리법 연구 개발
식품 자체의 조직과 색을 최대한 유지
냄새, 맛 등 손실을 최소화
Microwave, gel cast, electrophoresis tank
5. Procedure
① 20ml의 1 X TAE 용액에 agarose 0.4g을 섞어서 2%로 만든다. 열을 가하여 완전 용해 시키고 Ethidium bromide를 1mg/ml 농도로 첨가한다.
② 충분히 섞어 젤을 굳히는 판에 붓고 식을 때까지 기다린다. (굳힐 때는 comb를 끼워서 well을 만든다.)
③ 전기 영동 tank에 1 X TAE를
heat-shock 처리 직후에 선별배지(selective medium)에 플레이팅(plating)해서는 안되며 우선 항생제가 없는 배지에서 짧은 시간 동안 배양시켜야 한다. 그런 후에 형질전환된 세균이 플레이팅되어 항생제에 노출되었을 때 이들은 이미 생존할 수 있을 만큼 충분한 효소를 합성하고 있을 것이다.
Reference - http://blo
HGU
◇ Date: 20000. 00. 00 월요일
◇ Subject : DNA sub-cloning 1단계
◇ Principles
Plasmid: Bacterial cell 내에 염색체와는 독립적으로 존재하며 독자적으로 증식할 수 있는 Circular DNA로 세균의 생존에 필수적인 것은 아니다. Plasmid는 대부분 하나 이상의 유전자를 가지고, 이들 유전자는 종종 Host bacteria에 의해 나