Amino Acid의 Titration과 pH buffer 작용
Amino Acid를 NaOH와 같은 염기로 Titration을 하여 얻어지는 Titration Curve는 적정하는 Amino Acid의 pH buffer 작용을 잘 설명해 준다.
즉 Amino Acid의 Carboxyl기는 Weak Acid이므로 NaOH-와 같은 Strong Base와 반응하면 일정한 pH 범위 내에서 큰 pH 변화를 일으키지 않는 pH Buffer 작용을 한다는
다. Amino Acid의 Titration과 pH buffer 작용
Amino Acid를 NaOH와 같은 염기로 Titration을 하여 얻어지는 Titration Curve는 적정하는 Amino Acid의 pH buffer 작용을 잘 설명해 준다.
즉 Amino Acid의 Carboxyl기는 Weak Acid이므로 NaOH-와 같은 Strong Base와 반응하면 일정한 pH 범위 내에서 큰 pH 변화를 일으키지 않는 pH Buffer 작용을 한
4. Bradford Assay
- Bradford Reagent는 95% ethanol, 88% phosphoric acid, Brilliant Blue G로 이루어져 있다. Ethanol은 유기용매이기 때문에 coomassie blue를 Bradford reagent 내에 잘 용해 시키고, phosphoric acid는 reagent가 산성 조건을 충족시키게 한다. 산성 조건 하에서 Coomassie blue는 doubly-protonated red form이 되기 때문에 6개의 phenyl grou
blotting은 분자생물학, 생화학, 면역학 등 여러가지 분야에 사용된다.
이와 비슷한 원리를 이용, DNA detection은 southernblotting을 이용하며, RNA detection은 northern blotting을 이용하고, post-translational modification을 detection은 eastern blotting을 사용한다.
1) Transfer of protein to membrane
Constant current (200mA)를 가하는 이
Nucleic Acid Hybridization Techniques
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1. INTRODUCTION
* Southernblotting (DNA)와 northern blotting(RNA)의 원리
① nucleic acid 추출 → 제한효소 처리
② negative charge인 nucleic acid의 단편을 agarose gel 의 전기영동에 의해 크기로 분획
③ 분획된 RNA 또는 denatured DNA를 nitrocellulose 또는 nylon membrane에 고정