Introduction
식물의 유전자 조작은 아마도 농경이 시작된 선사 시대부터 지금까지 행하여져 오는 생명공학기술이라고 볼 수 있을 것이다. 아주 오래 전부터 사람들은 식물의 자연적인 교잡 결과 만들어진 가장 좋은 작물로부터 씨앗을 전발하고 유지하여 다음 경작시기에 가장 좋은 작물을 얻으려고 파
Method
M9 plate에서 worm을 S-media(1ml)로 모은 다음 2~3회 washing하고 30min동안 ice에서 bacteria가 모두 소화될 수 있도록 한다.(Bacteria 제거)
한번 더 washing해준다.
5000g에서 30s centrifuge한 후, worm만 남기고 S media는 제거해준다.
2X SDS buffer를 50㎕넣어주고 잘 섞일 수 있도록 pipeting한다
Ⅰ. 전기영동(electophoresis)
-기본적인 개념은 양전하와 음전하는 서로 잡아당긴다는 것이다.
전기적 끌림의 영향으로 더 많은 전하를 가지는 분자는 더 빠르게 움직이지만, 크기가 더 큰 분자를 움직이기 위해선 더 큰 힘을 필요로 한다. 그래서 결과적으로 보면 모든 DNA/RNA 분자들은 같은 속도로 양
2) Transfer
nitrocelluose, PVDF 및 nylone membrane같은 filter에 transfer하는 방법이다. 이렇게 transfer하는 과정 동안 단백질로부터 SDS가 제거되고 단백질의 구조가 재생되면서 본래의 항원 결정기를 갖게 된다. Transfer되는 과정 동안 이동 효율은 분자량에 달려 있는데 분자량이 작은 단백질은 큰 단백질에 비해 효율
cationic 및 anionic detergent로 다시 나뉘며 이들은 highly denaturant로 monomeric protein으로 단백질을 분리시키는 특성이 있어 Westernblot analysis 및 분자량 측정 등에 주로 이용한다. 그리고 Triton X-100과 같은 non-ionic detergent는 less protein denaturant이기 때문에 protein-protein interaction등에 주로 이용된다. 또한 CHAPS 등과