가장 보편적으로 사용되는 방법
SDS와 NaOH를 이용해서 cell을 깨고 chromosomal DNA와 protein등을 denaturation 시킴
High pH : DNA가 base pairing을 못함
Plasmid의 경우 작고 CCC form 이기 때문에 완전히 나눠지지 못함
pH가 정상으로 돌아오면, chromosomal DNA는 Protein등와 함께 침전되고 Plasmid는 상층액에 속함
Phenol
HGU
◇ Date: 20000. 00. 00 월요일
◇ Subject : DNA sub-cloning 1단계
◇ Principles
Plasmid: Bacterial cell 내에 염색체와는 독립적으로 존재하며 독자적으로 증식할 수 있는 Circular DNA로 세균의 생존에 필수적인 것은 아니다. Plasmid는 대부분 하나 이상의 유전자를 가지고, 이들 유전자는 종종 Host bacteria에 의해 나
1. DNA를 자른다는 것은 nucleotide를 연결하고 있는 phosphodiester bond를 끊어여러 DNA 단편을 만들어 내는 것을 의미한다. 이 때, 이런 역할을 하는 효소를nuclease라고 하며 그 종류로는 바깥 쪽을 절단하는 효소인 exonuclease와 안쪽을 절단하는 endonuclease가 있다.
2. 대표적 endonuclease인 제한효소(restriction enzyme)는