가장 보편적으로 사용되는 방법
SDS와 NaOH를 이용해서 cell을 깨고 chromosomal DNA와 protein등을 denaturation 시킴
High pH : DNA가 base pairing을 못함
Plasmid의 경우 작고 CCC form 이기 때문에 완전히 나눠지지 못함
pH가 정상으로 돌아오면, chromosomal DNA는 Protein등와 함께 침전되고 Plasmid는 상층액에 속함
Phenol
Dialysis
What is dialysis?
Dialysis is a membrane process where solutes (MW~<100 Da) diffuse from one side of the membrane (feed side) to the other (dialysate or permeate side) according to their concentration gradient. First application in the 70’s.
General Principles
Separation between solutes is obtained as a result of differences in diffusion rates.
These are arising from differe
혼합된 시료성분이 이동상 과 고정상 사이를 흐르면서 흡착, 분배, 이온교환 또는 분자크기 배재작용 등에 의해 각각의 단일 성분으로 분리되는 것을 말한다. 분리, 정성, 정량 등의 분석목적과 분리,정제,분취 목적에 이용된다.
1. Pump의 요건
a. 일정한 유속과 압력 유지.
b. 가동이 쉽고 다양한 용매를
1. 실험제목
- Alkaline Phosphatase(AP)의 정제
2. 실험목적
- Ion-exchange chromatography에 의한 단백질 정제 원리를 이해하고, DEAE anionexchange column을 이용한 AP 단백질의 정제기법을 습득하게 된다.
3. 실험원리
(1) Alkaline Phosphatase(AP)
- Phosphatase는 인산화 되어 있는 분자에서 인산기를 제거하는 효소이다.
exchange) 크로마토그래피, 분자간의 친화성에 근거를 둔 친화성 크로마토그래피가 있다. 이외에도 용질분자와 지지체(matrix) 위의 작용기 사이의 소수성 상호작용에 기초한 소수성 상호반응(hydrophobic interaction) 크로마토그래피, 그리고 크로마토그래피의 일반 원리에 기초한 종이 크로마토그래피, 얇은 막