annealing)
50°C∼65°C에서 진행되며, 염기간에 G와 C는 세 군데에서 수소결합이 일어나고, A와 T는 두 군데에서 결합이 일어나므로 G+C 비율에 따라 결합온도에 변화를 주어야 한다. 일반적으로 사용되는 annealing 온도는 아래의 표와 같다. 비 특이 PCR 산물이 형성되는 경우 결합온도를 올려서 반응시켜 보면
annealing extension 이렇게 세 단계로 구성되어 있고, 이 과정이 반복되면서 DNA가 증폭된다. 기본적으로 PCR을 구성하고 있는 요소들에는 DNA template, primer, dNTP, polymerase등이 있으며, PCR 과정에서 그것의 sensitivity와 accuracy에 가장 영향을 미치는 것은 primer와 temperature이다.
PCR의 가장 중요한 요소이며, 그것의
temperature transformation diagram): 온도, 시간, 변태곡선
3) 표면 경화법
① 화학적 표면 경화법
ⅰ) 침탄법: 고체(목탄, 코우크스), 가스(CO,CO2,메탄,에탄,프로판), 침탄깊이 0.5~2mm
ⅱ) 시안화법: KCN, NaCN (청화법)
ⅲ) 질화법: NH3, 50~100 Hr, 자동차의 크랭크축, 캠, 펌프축 등에 사용. 질화층 0.4~0.8mm
* 특징
>>PCR 산물의 전기영동 (electrophoresis)
PCR 산물의 전기영동은 agarose gel에서 시행합니다. 물론 때에 따라서 polyacrylamide gel을 쓸 수도 있지만 여기서 다룰 내용은 아닌 것 같습니다.
전기영동(electrophoresis)의 원리는 다 아시는 바와 같이 시료를 gel에 심은 후 전기를 걸어서 시료의 각 성분이 크기에 따라 다르