갖는 아가로스겔(agarose gel)이나 폴리아크릴아마이드겔(polyacrylamide gel)을 사용한다. 이러한 지지체 내에서 작은 물질은 빠르게, 큰 물질은 느리게 이동하므로 분자량에 따라 시료를 분리할 수 있다. 또한 시료의 이동거리와 분자량은 거의 반비례하므로 전기영동을 이용하여 분자량을 결정할 수 있다.
cationic 및 anionic detergent로 다시 나뉘며 이들은 highly denaturant로 monomeric protein으로 단백질을 분리시키는 특성이 있어 Western blot analysis 및 분자량 측정 등에 주로 이용한다. 그리고 Triton X-100과 같은 non-ionic detergent는 less protein denaturant이기 때문에 protein-protein interaction등에 주로 이용된다. 또한 CHAPS 등과
polyacrylamide가 흔히 쓰이며 분리하고자 하는 DNA의 크기에 따라서 선택을 한다. agarose gel을 100bp이상 20kb까지의 DNA를 분리하는데 사용되며 polyacrylamide gel은 1kb이하 크기의 DNA를 분리하는데 이용된다.
(2) Agarose gel에서 DNA migration rate에 영향을 주는 factors
DNA molecule size, Agarose concentration, DNA의 conformation(superhe
Nucleic Acid Hybridization Techniques
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1. INTRODUCTION
* Southern blotting (DNA)와 northern blotting(RNA)의 원리
① nucleic acid 추출 → 제한효소 처리
② negative charge인 nucleic acid의 단편을 agarose gel 의 전기영동에 의해 크기로 분획
③ 분획된 RNA 또는 denatured DNA를 nitrocellulose 또는 nylon membrane에 고정
Chromatography I
1980년 소련의 식물학자, 생화학자 Tswett
식물의 잎사귀에 존재하는 색소를 분리시도
Inulin등의 여러 흡착제를 충진시킨 column에 petroleum ether로 추출한 잎사귀 추출액을 소량 가하고 동일 용매로 용리 (elution)시켰을 때 서로 다른 색깔의 띠를 확인
희랍어어원 color + write = chromatography