DNA sub-cloning의 1단계: 원하는 유전자를 분리한다.
실험날짜 : 2011.10.24-28
실험목표 : DNA의 ligation/insertion process를 보고 그 결과를 확인한다. pET-14b vector에 antibiotic resistant 한 gene을 ligation 시키고, 후에 그 DNA를 component cell에 다시 삽입하여 ampicillin을 통해서 제대로 target gene이 삽입되었는지를 관찰하는 것
Clone = identical
Ex) Cell clone
Bacterial clone
Human clone
Gene clone
Gene Cloning
동일한 유전자의 집합을
만드는 과정
유전자 연구를 위해 다량의
동일한 유전자 필요
Reason detail......
가장 중요하고 모든 실험의 기본
모든 고급 테크닉의 시발점
재조합 DNA, 기본적인 효소 처리
2재조합 DNA
(Ge
clone을 선택한다
Plasmid DNA 분리
Restriction enzyme mapping
DNA sequencing
Gene cloning의 결과
1.원하는 유전자를 얻어낸다
유전자는 mRNA에서 얻을 수도 DNA에서 얻을 수도 있다. 이때 RNA는 각 장기마다 발현하는 정도가 다르므로 반드시 내가 원하는 유전자가 많이 발현하는 곳에서 유전자를 얻어야 한다. 그리
1. Cloning의 정의
․ Clone ; identical하다.
ex) Cell clone은 identical한 cell의 집합
Bacterial clone은 같은 형질의 세균들 집합
Human clone은 복제인간
Gene clone은 동일한 유전자의 집합
위의 그림에서와 같이 한 cell에서 배양하여 가득 채운 cell들은 모두 identical하다는 전제하에 실험을 하게 된
Subject : DNA sub-cloning을 위해 원하는 유전자를 분리한다.
Purpose: DNA sub-cloning에 사용할 원하는 유전자를 만들기 위해 plasmid(vector)내에 restriction enzyme을 사용하여 DNA를 자르고 원하는 유전자를 삽입한 후, 목적하는 유전자가 정확하게 cloning되었는지 DNA 전기영동 결과를 분석하여 확인할 수 있