⇒ 재결정이란 결정을 용융(melting)시켜 결정구조를 완전히 분열시킨 후 다시 새로운 결정 을 형성하게 함으로써 불순물(impurity)을 용융액(melt)이나 용액속에 남아 있게 하여 순도(purity)를 높이는 방법이다. 이러한 재결정법의 기본적 원리는 온도에 따른 용해도(solubility)의 차를 이용하는 것이다.
냉간
decolorizing agent) 으로 씻어내면 착색된 CV-I 복합체가 용해되는데, 어떤 것은 보라색이 씻겨 나가서 백색으로 보이고 어떤 것은 보라색이 그대로 남는다. alcohol을 씻어내고 분홍색의 염기성 색소인 safranin으로 염색을 하면 보라색이 씻겨나가서 백색으로 보였던 세균에 분홍색이 염색된다. 여기서 decolorizin
decolorizing agent)에 의해 탈색되는지 여부에 의해 실험 결과가 결정되며, 탈색정도는 세균 세포벽 구성성분의 차이에 의하여 결정된다. 그람양성균은 20~28 정도의 두꺼운 peptidoglycan층을 지니고 있고, 그람음성세균은 2~7 정도의 그람양성균에 비하여 얇은 peptidoglycan층을 지니고 있으며 지질(lipid)을 함유한
2) 원리
Gram positive bacteria와 Gram negative bacteria는 cell membrane의 구성에 큰 차이가 있다. 그 중 Gram staining에 영향을 주는 peptidoglycan층의 두께가 Gram positive bacteria가 훨씬 두꺼워 위의 Gram staining 단계에서 crytal violet-iodine의 decolorization이 일어나지 못해 Gram +는 purple, Gram -는 red을 띄게 된다.
But, 오래된
coli 의 identification을 위하여 gram 염색을 실시하였다. E.coli는 gram negative 균으로 peptidoglycan layer가 단일층으로 존재하고, 세포벽이 지방성분이 풍부한 lipopolysaccharide (LPS)로 이루어져 있어 organic decolorizer(탈색제)에 의해 crystal violet이 쉽게 탈색되어 따라서 염색액인 safranin O로 염색되어 붉은색을 나타낸다.