9R-1. Affinity chromatography, Ion chromatography, gel chromatography를 각각 설명하라.
Affinity chromatography
서로 생물학적으로 높은 특이적 친화성을 갖는 2종류의 물질중 한 쪽을 고정상으로 사용하여 그 고정상에 대한 친화성의 차이를 이용해 목적물질과 불순물을 분리하는 크로마토그래피. 예를 들어 특이성이
gel plate, pencil, plate cutter(knife), ruler, UV Lamp.
㉢ 과정(Procedure) :
1) 미리 실험한 결과를 보고 어떻게 실험할 것인지 결정한다.
2) 높이 6cm, 넓이 2.5cm가 되도록 silica gel plate를 잘라서 준비한다.
3) silica gel plate에 sample을 출발시킬 위치(아래에서 1.5cm)와 mobile phase가 최종적으로 이동할 위치(출발 위치로
Discussion
Stationary phase인 Silica gel은 polar하다.
Mobile phase는 nonpolar한 n-Hexane과 polar한 Ethyl Acetate의 비율에 따라 polarity가 달라진다. 세 번째 실험(Hexane: Ethyl Acetate = 1 : 100)에서 sample들이 모두 다 윗부분에 모이고 분리가 잘 되지 않은 이유는 mobile phase가 너무 polar했기 때문에 sample들과 affinity가 너무
2-D gel electrophoresis는 먼저 단백질의 pl에 의해 분리하고, 2차로 크기에 의해 분리하는 가장 일반적 방법이다.
신약 개발 시 단백질 분리는 반드시 필요하며 제약회사나 Bio tech 회사들은 전기영동과 Chromatography 방법을 사용하여 새로운 단백질을 찾고 특정 질병을 치료할 수 있는 물질을 찾고 있다.