1. DNA를 자른다는 것은 nucleotide를 연결하고 있는 phosphodiester bond를 끊어여러 DNA 단편을 만들어 내는 것을 의미한다. 이 때, 이런 역할을 하는 효소를nuclease라고 하며 그 종류로는 바깥 쪽을 절단하는 효소인 exonuclease와 안쪽을 절단하는 endonuclease가 있다.
2. 대표적 endonuclease인 제한효소(restriction enzyme)는
Subject : DNA sub-cloning을 위해 원하는 유전자를 분리한다.
Purpose: DNA sub-cloning에 사용할 원하는 유전자를 만들기 위해 plasmid(vector)내에 restriction enzyme을 사용하여 DNA를 자르고 원하는 유전자를 삽입한 후, 목적하는 유전자가 정확하게 cloning되었는지 DNA 전기영동 결과를 분석하여 확인할 수 있
loading buffer,
pipette, binding column, spindown centrifuge, Water bath, microwave, Electrophoresis tank, e-tubes, ice box, gel cast, blade, heat block, vortex, table top centrifuge
5. Procedure
1) Digestion of DNA with Restriction Enzyme
① Extracted plasmid와 buffer, DDW를 먼저 섞고 마지막에 제한효소를 넣는다.
Plasmid only or inserted Plasmid 5 μl
콜린성 수용체 등에 길항
Pharmacokinetics (ADME)
Absorption
Almost complete
경구투여 시 first-pass effect로 생체이용률 60-70%
Distribution
95%는 혈장단백질 결합
반감기 : 약 12시간
Metabolism
Cytochrome P450에 의해 대사
Norclozapine : pharmacologically active
CYP1A2 inducer : smoking
CYP1A2 inhibitor : theophylline, ciprofloxacin, fluvoxamine