4. Bradford Assay
- Bradford Reagent는 95% ethanol, 88% phosphoric acid, Brilliant Blue G로 이루어져 있다. Ethanol은 유기용매이기 때문에 coomassie blue를 Bradford reagent 내에 잘 용해 시키고, phosphoric acid는 reagent가 산성 조건을 충족시키게 한다. 산성 조건 하에서 Coomassie blue는 doubly-protonated red form이 되기 때문에 6개의 phenyl grou
The sulphated polysaccharides extracteds from marin brown algae, represent a source of marine compounds with potential applications in medicine and main compounds of fucoidan are L-fucose and sulphate ester groups.
It has been reported that fucoidan inhibited cancer(Aisa et al. 2005; Liu et al. 2005).
Enhanced the immune functions in cell studies(Blondin et al. 1996;Hsu et al. 2001).
However
2] 선행연구
[ 항암제에 대한 암세포의 주요 내성기전 ]
1) 약물 배출 증가 (Increased efflux of the drug)
Cancer stem cells의 다약제내성(MDR:multidrug resistance)은 세포질로부터 항암 약물 을 밖으로 배출하는 Efflux pump가 과발현 되기 때문이다. 예를 들어, PGP (P-glycoprotein) 는 ATP 의존적인 Efflux protein
I. Protein Extraction – Micro Smash MS-100 equipment 사용
<실험 전 준비>
얼음(정사각형 스티로폼), E-tube 총 38개(8개×4세트->extract 옮길 것(sonication), centrifuge 상층액 뜰 것, 정량할 것, western 용/ 6개-> standard곡선 그릴 것), screw tube(cap-tube, 뚜껑 초록색) 8개
1. E-tube에 bead (큰 것 2개, 작은 것 10개) 넣어서 ice-rack에
다. Amino Acid의 Titration과 pH buffer 작용
Amino Acid를 NaOH와 같은 염기로 Titration을 하여 얻어지는 Titration Curve는 적정하는 Amino Acid의 pH buffer 작용을 잘 설명해 준다.
즉 Amino Acid의 Carboxyl기는 Weak Acid이므로 NaOH-와 같은 Strong Base와 반응하면 일정한 pH 범위 내에서 큰 pH 변화를 일으키지 않는 pH Buffer 작용을 한