단백질의 전기영동(SDS-PAGE)
단백질이나 핵산 등의 고분자물질은 하전을 띄므로 이를 기초로 하여 이들 분자를 전기장을 띤 매질(겔)에서 이동 분리시켜 이들의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 방법을 전기영동(electrophoresis)라 한다. 특히 단백질의 경우는 SDS (sodium dodecyl sulfate)를 포함한 SDS-P
평판(slab)에서 동시에 여러 시료와 표준 물질을 분석 할 수 있는 기법.
Gel의 세공 크기를 조절하여 하전된 물질의 이동속도 결정.
대표적 Gel 물질: Agarose & Polyacrylamide.
Polyacrylamide 농도:3~20% 가능
단백질은 SDS와 polyacrylamide 전기영동(SDS-PAGE)→ 분자량에 따른 분리
PCR 산물의 확인
정제
전기영동에 관해 간단히 설명하라
전기영동(electrophoresis)은 생체 고분자들의 성질을 연구하고, 그것들을 분석, 분리, 정제하
는 중요한 방법 중에 하나이다. 전기영동법으로 DNA, RNA나 단백질 등을 분리할 수 있는
것은 이들 분자가 고유의 전하를 띠고있어 전기장(electric field)에 놓이게 되면 서로 다른
일반생물학및실험 Report 2020 November 01
생물학 실험 Report
의생명공학과
Ⅰ. 기본정보
실험 제목: DNA Gel electrophoresis
실험 목적: 플라스미드 DNA와 PCR 생산물을 전기영동을 통해 확인하는 실험
실험자: antler11
Ⅱ. 서론 (Introduction)
1. PCR (polymerase chain reaction)
PCR(polymerase chain reaction)은 1983년, K.B.Mullis가 고
전기영동법과 PCR을 이용하여
DNA를 분리하고 확인하는 기술을 습득한다. 제한효소의 종류에 따른 절단 방식을
알아본다.
2. 실험 원리
1) 제한 효소 (Restriction enzyme)
(1) 제한 효소의 정의
* 제한 효소는 DNA 분자의 특정 염기 배열을 인식하여 자르는 일종의 DNA용
가위이다.
- DNA
전기영동시 이동속도가 다른 두 개의 염색시약이 들어 있어, DNA와 같이 전기영동 될 때 DNA가 움직인 정도를 알 수 있게 하는 역할을 한다.
3) Electrophoresis buffer
TAE(Tris-acetate EDTA): DNA분자량이 큰 경우, agarose electrophoresis에서 쓴다.
TBE(Tris-borate EDTA): DNA분자량이 작은 경우, DNA sequencing에 쓰인다.
3. Reagents
전기영동법과 PCR을 이용하여
DNA를 분리하고 확인하는 기술을 습득한다. 제한효소의 종류에 따른 절단 방식을
알아본다.
2. 실험 원리
1) 제한 효소 (Restriction enzyme)
(1) 제한 효소의 정의
* 제한 효소는 DNA 분자의 특정 염기 배열을 인식하여 자르는 일종의 DNA용
가위이다.
- DNA
전기영동(agarose gel electrophoresis)에 의한 유전자의 분리
a. Agarose gel 전기영동 시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들로는 DNA의 분자의 크기, Agarose의 농도, DNA 형태에 따라 이동속도가 다르다. 또 전압이 높을수록 전기장의 방향, Ethidium bromide, 전기영동 buffer의 성분과 이온의 강도도 전기영동 속도에 영향을
전기-중기-후기-말기의 과정으로 나타나는데 이번 실험은 이러한 분열 시기에 해당하는 여러 가지의 세포 샘플을 현미경으로 관찰하면서 세포의 분열에 대하여 알아본다.
2. Materials and Methods
(1) Materials
- 재료 : Lily anther, Onion Mitosis root tip, Orchid aerial root 가 실제로 관찰한 재 료임.
- 시