2R-1. 원핵세포에서 Chromosomal DNA와 Plasmid DNA의 형태학적인 차이점을 설명하라.
1) Chromosomal DNA 의 구조
: 원핵세포의 chromosomal DNA는 불규칙한 모양으로 핵양체(nucleoid)라는 부분에 모여 있다. 대부분의 원핵세포는 단일한 고리 모양의 이중나선 DNA(deoxyribonucleic acid)를 지니지만 어떤 세균은 선형 DNA를 염색
DNA chip은 Southern blot(그림 1)이나 Nothern blot과 같이 혼성화(Hybridization) 원리를 사용한 것으로 1995년 미국의 스탠포드 대학에서 처음으로 발명되었다. 여기서 혼성화란 DNA 이중 나선이 A-T, G-C와 같이 코드가 특별하게 맞을 경우 달라붙는 성질을 말한다. Southern blot이 니트로 셀룰로오스 막(Nitro cellulose membrane
Alkaline lysis method
- 세포의 cell wall과 cell membrane을 부수고 DNA만을 분리하는 방법
- Chromosomal DNA 와 plasmid의 고유한 형태 구조 차이를 이용 !
; Chromosomal DNA - 상대적으로 size가 크고, double heilx
Plasmid - size가 작고, supercoiled 형태 -> pH에 변화에 의한 변성↓
Alkaline Lysis Method
DNA gel electrophoresis(전기영동)
- DN
Enzyme restriction Enzyme restriction & Ligation
DNA도 특정부위를 자르고 붙일 수 있다. DNA를 자른다는 것은 nucleotide들이 연결되어 있는 phosphodiester 결합을 끊어내는 것을 의미하는데, 이런 역할을 하는 효소를 nuclease라고 하며 바깥쪽을 자르는가 안쪽을 자르는가에 따라서 각각 exonuclease, endonuclease
Nucleic Acid Hybridization Techniques
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1. INTRODUCTION
* Southern blotting (DNA)와 northern blotting(RNA)의 원리
① nucleic acid 추출 → 제한효소 처리
② negative charge인 nucleic acid의 단편을 agarose gel 의 전기영동에 의해 크기로 분획
③ 분획된 RNA 또는 denatured DNA를 nitrocellulose 또는 nylon membrane에 고정
DNA Amplification Techniques
1. introduction
- PCR의 특징 : 진단의 민감도(senstivity)와 정확도(accuracy)를 향상
- PCR 발달과정 : PCR의 synthetic cycle은 Klenow fragment of DNA polymeraseⅠ, heat-resistant Taq의 도입이후 빠르고 활발한 발전
- 다양한 핵산증폭기술로 인해 분자의학에 이용
ex) i) ligase chain reaction은 유전자 돌연변이의
형질 전환의 신비
Transformation
형질 전환 (Transformation) 이란?
세균이 외부에 존재하는 DNA를 자기 스스로 세포 안으로 끌어들여서 자신의 형질을 변화시키는 것
Prokayote와 Eukaryote에서 DNA를 세포 내로 주일 할때 다음과 같이 조금
다른 용어를 사용. 이 실험에서는 Prokaryote인 E.coli를 사용하므로
‘Transformation
generated and they suppress proliferative and cytokine responses against allergen.
Antibody class-switching
B cells secrete allergen-specific IgG4 instead of IgE which has blocking capacity inhibiting binding between allergen and IgE on mast cells and basophils.
Immune response to allergen
Immune response influenced by several factors
Genetic susceptibility
The nature of antigen which initiates
GENES CONDOMINIUM. EARLY MORNING.
JEROME emerges from the incinerator room into a large, luxurious
loft-style condo containing a bizarre assortment of equipment -
arranged somewhat like a production line.
Long, scrupulously clean metal work benches are arranged along
one entire wall. Laid out on the benches in neat rows are
dozens of plastic bags - some filled, some unfilled. Instruments
on trays