DNA Amplification Techniques
1. introduction
- PCR의 특징 : 진단의 민감도(senstivity)와 정확도(accuracy)를 향상
- PCR 발달과정 : PCR의 synthetic cycle은 Klenow fragment of DNA polymeraseⅠ, heat-resistant Taq의 도입이후 빠르고 활발한 발전
- 다양한 핵산증폭기술로 인해 분자의학에 이용
ex) i) ligase chain reaction은 유전자 돌연변이의
진단 분자 유전학 REPORT
chapter Ⅵ ; RT - PCR
▶ RT-PCR ◀
1. Introduction
RNA level을 측정할 수 있는 능력은 유전자 발현 연구에 핵심적인 역할을 해왔다.
Northern blot, dot/slot blot, nuclease protection assay 는 전통적으로 mRNA 발현 분석에 사용되었던 방법이었으나, 민감도가 떨어지고, 많은 양의 RNA를 요구하기 때문에
초파리의 염색체 성 결정
포유류의 초파리 모두 XX 암컷과 XY 수컷으로 태어나지만 염색체의 작용 경로는 전혀 다르다. 초파리의 경우 성결정은 X염색제의 암컷결정인자와 상염색체의 수컷 결정인자 간의 비율에 따른다. 보통의 결루 초파리는 1~2개의 X염색체와 두벌의 상염색체를 가지고 있다. 2배체
Ⅰ. DNA, 디옥시리보핵산(deoxyribonucleic acid/DNA)
1. 핵산
핵산 분자는 뉴클레오티드라는 반복되는 구조단위로 이루어진 긴 사슬이다. 뉴클레오티드는 중앙에 있는 당(糖)과 거기에 결합된 인산기와 질소유기염기로 이루어지는데 간단히 질소 염기와 인산기가 서로 수직으로 위치한다고 보면 된다. 핵산
1) 원핵생물
원핵생물(prokaryotes; pro는 이전을 뜻함)이란 무핵세포로 이루어진 생물을 뜻하는 말이다. 박테리아와 원핵생물은 일반적으로 서로 구분 없이 사용된다. 원핵세포는 히스톤 단백질(histone)이 결합되지 않은 하나의 염색체만을 갖고 막으로 싸인 핵을 가지지 않아 핵양체를 이룬다. 원생생물
ALS는 유전적으로 다양한 질병이다. 최소한 15개의 ALS 관련 유전자 부위가 밝혀졌고, 가족의 ALS의 약 30%에서 원인이 되는 유전자가 알려져 있다. 산발적인 유형에서는 근본적인 요인들이 잘 알려져있지 않다. 운동뉴런의 상처는 여러 병원성 경로의 복잡한 상호 작용을 통해 일어난다는 현재의 견해와 함
1. 연구의 필요성
1-1.국내 연구의 필요성
✔ 최근 선진 각국에서 환경 문제가 크게 부각되면서 유기 합성농약의 성장세가 크게
둔화되었으며, 친환경농업육성법의 시행과 함께 2013년까지 화학비료 및 농약사용량
40%감축을 목표로 친환경 농업의 필요성이 강조되고 있다.
✔ 사회적으
(다) 유전자이식, 적중 생쥐 및 질환모델 생쥐
- 유전자이식 생쥐 수요처는 불특정 다수가 아니라 특정의 연구집단이며 유전자 기능연구에 필수적이나 고가로 인하여 주문이 어려운 실정으로, 저변 확대를 위하여 할인 행사 등을 실시하여 매출확대를 추진
- 일본 등 해외시장의 공략을 본격화하고
Discussion
실험결과 해석 관련
본 실험결과는 HUVEC에서 RNA를 isolation 한 후, RT-PCR을 수행한 후 gel-electrophorsis를 이용해 합성된 cDNA양을 알아본 사진이다. gel사진의 보면 1번 lane은 band가 존재하기 때문에 cDNA의 합성이 되었음을 알 수가 있고, 2번 lane은 유의미한 band가 존재하지 않아 cDNA합성이 이루어지지
2. Method
[실험재료]
premix, template & primer, D.W, mineral oil, thermocycler(PCR기계), Seakem LE agarose, gel caster, 1×TAE, EtBr, 마이크로피펫, 1.5㎖ tube
[실험방법]
① premix가 들어있는 20㎕ tube에 template DNA 1㎕, primer 2㎕를 D.W 17㎕를 넣고 잘 섞기 위해 vortexing 해준다.
② 적당하게 centrifuge 해준다.
- vortexing 시에 위로