◎ Date – 2011.04.06 (Wed)
◎ Principle
1. HPLC (High Performance[Pressure] Liquid Chromatography)란 무엇인가?
이동상에 액체를 쓰는 액체 크로마토그래프의 일종으로 고압 LC(high pressure LC), 고성능 LC 등으로 말하는 경우도 있다. 보통 HPLC로 불리며 액-액, 액-고, 이온교환, 겔 침투 크로마토그래피 4종류로 분류
1. 서 론
1.1 크로마토그래피(Chromatography)
크로마토그래피는 chromos(color)와 graphein(write)의 합성어, 즉 색을 통해 분석하는 것으로, 혼합물(mixture)의 분리 방법 중 하나이다. 다른 혼합물 분리 방법 중 하나인 추출(extraction)과 같은 원리로 시행되지만, 하나의 상(phase)은 다른 하나의 상이 지나가는 동안 고정
elution
단편해석(base sequencing)
Southern & Northern blot 해석
Agarose gel로부터 DNA fragment를 자른다.
2. 1.5ml microcentrifuge tube 에 gel slice를 넣어 무게를 재고 QG buffer를 gel 무게의 3배만큼 첨가.
3. 50도에서 10min incubate, incubation 동안 매 2~3분마다 vortexing 하면서 mix
4. Sample에 gel volume의 동령으로 iso-propanol 첨
가. 크로마토그래피의 정의
(1) 크로마토그래피는 크기, 전하, 흡착성 또는 생물학적 친화성(affinity)의 차이에 근거를 두고 미세한 입자를 충전시킨 컬럼을 통하여 유체를 균일하게 침투 통과시키는 과정에서 유체내 어떤 성분이 선택적으로 지연되어 결과적으로 물질이 분리되는 것을 말한다.
나.
의미한다.
정지상에 의하여 약하게 흡착된 성분들은 이동상의 흐르는 방향을 따라 더 빠른 속도로 정지상을 통과하게 되고 각 성분들은 서로 다른 이동 속도에 따라 분리된다. 이러한 조작을 용리(elution)이라고 하며 용리 시간에 대한 검출기의 감응을 나타내는 그래프를 크로마토그램이라고 한다.