분자생물학 Polymerase Chain Reaction[PCR]에 대해서

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레포트 > 사회계열
2013.12.23
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본문내용

- Ploymerase chain reaction ( PCR: 중합효소 연쇄반응 )
: PCR은 비교적 새로운 기술인데 매우 간단하면서 감도가 높고 응용범위가 넓어 현대생명과학에 서 가장 중요한 테크놀로지 중의 하나로 자리잡았다. PCR은 1980년대 중반에 Kary Mullis에 의해 고안되었다. 이는 DNA 염기서열 분석법과 마찬가지로 유전자 연구와 분석에 새로운 접근을 가능 하게 했다. PCR은 DNA 중합효소의 반응 즉 DNA 복제가 연쇄적으로 일어나는 반응이다. 그러나 세포에서의 복제같이 염색체가 전부 복제되는 것은 아니고 좁은 장소, 한 군데 정해진 곳에서만 일어난다. 그러니까 특정 염기순서만 거듭 복제되는 반응이 된다.
PCR 반응은 주형 DNA, DNA 중합효소, 복제지점을 정하는 프라이머(primer) 그리고 DNA 합성 의 재료인 뉴클레오타이드(nucleotide), 이 네 가지 요소를 필요로 한다. PCR의 시작 재료는 증폭 할 서열을 지닌 DNA이다. PCR을 할 DNA는 종종 세포로부터 추출한 총 genome DNA가 된다. 그러나 PCR은 순수 분리한 DNA를 요구하지 않는다. 또한 세포를 끓여서 얻은 정제를 하지 않은 DNA도 사용될 수 있다. 반응에 사용되는 프라이머에 의해 제한되므로 증폭되어질 서열을 분리할 필요는 없다. PCR에 사용될 DNA의 양은 극히 미량이다. 일반적 실험에서는 전체 genome DNA 인 경우 ㎍정도 이하로써도 충분하나 PCR은 한 개의 DNA 분자로부터 염기서열을 증폭할 수 있 다. DNA 합성의 개시점을 나타내는 두 개의 올리고뉴클레오타이드 프라이머, DNA 중합효소, 4종 류의 디옥시뉴클레오타이드 전구체의 혼합물을 DNA가 있는 시험관 내에 넣는데 총량은 보통 100 ㎍이 된다. 프라이머는 인공적으로 합성된 단일나선의 짧은 DNA인데 프라이머의 염기순서가 genome의 특정 부위의 염기순서와 보합하도록 만들어진다. 뉴클레오타이드는 당, 염기, 그리고 인 산으로 구성되는 DNA의 구성단위이다.

참고문헌

➀ 『생물학 실험서』, 민철기, 강창수, 라이프사이언스,
➁ NELSON, COX, 『레닌저 생화학 (상) 4판』, 백형환, 윤경식, 월드사이언스.
➂ 『분자생물학 입문』.이영렬 편저. 한빛지적소유센터.

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