유전자 진단 방법 - PCRPCR(Polymerase Chain Reaction)법은 유전자 진단 방법중 하나로 특정 DNA 영역을시험 내에서 효소에 의해 증폭하는 방법이다. 1985년 Mullis 등에 의해 개발되었고, 그는 1993년 노벨 화학상을 받았다. PCR이 등징하기전, DNA 진단을 위해서는 하프로이등당 30억개의 염기쌍으로 이루어지는 사람
① cDNA를 PCR기계에 넣고 양을 증폭 시킨다.
①-1) Tube에 cDNA template, 10x PCR buffer 2μl, 2.5mM dNTP 1.6μl, forward/reverse primer 각각 1μl씩 해서 2μl, Taq DNA polymerase 0.2μl, 20μl를 맞추기 위한 정제수를 넣어 PCR을 할 용액을 만든다.
①-2) PCR 기계에 tube를 넣고 증폭될 때까지 기다린다.
② 미리 준비된 4
소요, 수많은 Sample을 처리하는데 며칠이 걸림
RT-PCR을 포함한 기존의 PCR 방법은 원래의 양을 측정할 수 없고 추가적인
실험이 필요
Real-time PCR
Real-time PCR은 병원균 양을 신속하게 분석 가능
사이클마다 증폭된 DNA에 비례하는 형광 물질 발생
형광물질 양을 계산하여 최초의 DNA양을 측정
- Ploymerase chain reaction ( PCR: 중합효소 연쇄반응 )
: PCR은 비교적 새로운 기술인데 매우 간단하면서 감도가 높고 응용범위가 넓어 현대생명과학에 서 가장 중요한 테크놀로지 중의 하나로 자리잡았다. PCR은 1980년대 중반에 Kary Mullis에 의해 고안되었다. 이는 DNA 염기서열 분석법과 마찬가지로 유전자 연구
♥ PCR의 종류와 응용의 예
◈ PCR의 종류
다음과 같은 종류들이 있다.
CML PCR
HCV-PCR
HCV RT-PCR
HPV PCR
Nested TB-PCR
Nested RT-PCR
Mycoplasma-PCR
ALL RT-PCR
Chlamydia-PCR
MULTIPLEX PCR
모든 PCR종류에 대해서 자세히 조사를 하지 못했지만, 몇가지에 대해서 알아보면 다음과 같다.
① Access RT-PCR system
product
1. Introduction
1)PCRPCR 이란 DNA의 원하는 부분 (target sequence)을 증폭하는 방법이다.
denaturation, annealing, extension 3가지 과정으로 구성되어 있고
이 과정이(circle) 반복 되면서 DNA가 증폭된다.
PCR 과정
1단계[denaturation]-약 95도 정도에서 1~2분 정도 진행된다. 온도가 높아지면서 DNA사이에 있는 염기 사이에