소개글
[생물학실험] Sanger seqeuncing과 DNA sequencing 방법의 변천사에 대한 자료입니다.
목차
Sanger sequencing (=chain terminator sequencing)
1) radioactively labeled primer 사용
2) fluorescently labeled primer
3) fluorescently labeled ddNTP
Chemical sequencing (=Maxam-Gilbert Sequencing)
본문내용
Sanger sequencing (=chain terminator sequencing)
Sanger sequencing에서 사용하는 ddNTP. 이것은 3‘-OH가 없기 때문에 dNTP자리에 삽입될 경우 그 이후의 DNA elongation이 일어나지 않게 된다.
Sanger method의 sequencing 원리
Sanger method - dNTP뿐 아니라 ddNTP를 사용해 PCR을 수행한 후 다양한 길이의 PCR products의 3‘ nucleotide를 확인해 sequencing을 하는 방법이다. 처음에 이 방법이 고안된 뒤로 위의 기본적인 원리를 유지한 채 terminator를 확인하기 위한 새로운 전략들이 개발되었는데, 이로 인해 실험 방법이 보다 단순해지고 자동화되었다.