9R-1. Affinity chromatography, Ion chromatography, gel chromatography를 각각 설명하라.
Affinity chromatography
서로 생물학적으로 높은 특이적 친화성을 갖는 2종류의 물질중 한 쪽을 고정상으로 사용하여 그 고정상에 대한 친화성의 차이를 이용해 목적물질과 불순물을 분리하는 크로마토그래피. 예를 들어 특이성이
- WPC [whey protein concentrate 농축유청단백질] 단백질 순도 35%~87%, 빠른 흡수, 생물가 104 우유에서 유청 단백질을 필터링해 추출할때 유당(락토스)까지 포함한 상태 WPC가 많으면 배탈이 날 염려가 많음.
- WPI [whey protein isolate 분리유청단백질] 단백질 순도 88%~95%, 10분 이내 흡수, 생물가 159 WPC를 몆번 더
SDS-PAG
SDS-PAGE, sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis는 생화학과 유전학 및 분자 생물학에 이용되는 단백질분리 기술로, 그들의 전기 영동 이동성(polypeptide chain의 길이 또는 분자량 뿐만 아니라 Protein folding, Posttranslational modification과 다른 인자들에 의한)을 이용한 기술이다.
1) SDS-PAGE에서 단백
왜 단백질을 분리하여만 하는가?
단백질분리는 proteomics, drug 발견과 생산에 매우 중요한 일이다.
이런 모든 분야에서 반드시 sample preparation, protein identification, characterization, purification등이 포함된다.
Proteomics나 혹은 발현된 단백질의 기능 연구하는 경우에 단백질분리는 필수적이다.
“Workhorse of prote
단백질 혼합물이 100℃ 내외에서 SDS와 함께 가열되면 SDS가 polypeptide backbone을 둘러싸게 되어 negative charge를 부여한다. 이를 통해 각각의 polypeptide는 charge가 negative하게 통일되고, 이로 인해 electrophoresis동안 단백질이 charge에 관계없이 크기에 의해 분리될 수 있게 한다.
3) PRO-PREPTM Protein Ex