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분야
doc실험 방법
실험 결과
결론
참고문헌
측정이 되는 원리
(1) 혈청 중성 지방 (TG) 측정: 효소이용
Triglyceride → LPL → glycerol + fatty acid → GK → L-glycerol-3-phospate → GPO → H2O2 + 4-아미노안티피린 + ESPT → POD → 키노이드 색소
(2) 혈청 총 콜레스테롤 (TC) 측정
H2O + Cholesterol Ester → CHE → free Cholesterol + 지방산
free Cholesterol + O2 → COD → Cholest-4-en-3-one + H2O2
H2O2 + 4-아미노안티피린 + 페놀 → POD → 적색 Quinone
(3) 혈청 HDL 측정: HDL-시555 (HDL-C)을 이용한 Phosphotungstic acid-Mg++ 측정법
혈청에 인텅그스텐산나트륨 및 염화마그네슘으로 된 침전시액을 가하면 유리미질입(chylomicron), 초저비중리포단백(VLDL), 저비중리포단백(LDL)은 인텅그스텐나프륨 및 염화마그네슘이온과 결합하여 침전물을 형성하여 2가의 금속이온에 의하 하스코르빈산은 산화되므로 측정에 있어 그 영향을 피하게 된다.
실험 방법
(1) 혈청 중성 지방 (TG) 측정
① 혈청 20㎕ + 효소 시액 3000㎕
② 표준액 20㎕ + 효소 시액 3000㎕
③ 37℃ 온수조에서 10 분간 가온
④ 60분 이내에 550nm로 흡광도 측정
(2) 혈청 총 콜레스테롤 (TC) 측정
① 혈청 20㎕ + 효소 시액 3000㎕
② 표준액(7개) 20㎕ + 효소 시액 3000㎕
③ 잘 혼합하여 37℃ 온수조에서 5 분간 가온
④ 60분 이내에 시액맹검법에 대조로 하여 505nm로 흡광도 측정
(3) 혈청 HDL 측정
① 혈장 30㎕ + 침전 시액 300㎕
② 잘 혼합하여 실온에서 10분간 방치
③ 3000rpm이상에서 10분간 원심분리
④ 상등액 50㎕ + 효소 시액 3000㎕
⑤ 표준액 50㎕ + 효소 시액 3000㎕
⑥ 잘 혼합하여 37℃ 온수조에서 5 분간 가온
⑦ 60분 이내에 시액맹검과 대조하여 555nm로 흡광도 측정
(4) 혈청 LDL 측정
HDL, TC, TG 측정 후 Friedwald 공식 계산식에 의해서 LDL 수치를 산출한다.
LDL cholesterol 농도 = 총 콜레스테롤 농도 – HDL cholesrerol 농도 – (TG농도/5)
실험 결과
▪ 표준액 흡광도 결과
(mg/d)l 0 9.375 18.75 37.5 75 150 300
(1) TG 0.025 0.022 0.036 0.057 0.103 0.205 0.351
(2) TC 0.024 0.025 0.047 0.064 0.0101 0.189 0.346
(mg/d)l 0 3.125 6.25 12.5 25 50
(3) HDL 0.046 0.065 0.103 0.128 0.222 0.414
Y = 0.0011X + 0.0187 Y = 0.0011X +0.0222 Y = 0.0073X + 0.045
X = 10000(Y-0.0187)/11 X = 10000(Y – 0.0222)/11 X = 10000(Y – 0.045)/73
R2 = 0.995 R2 = 0.9987 R2 = 0.9971
▪ 시료 흡광도 결과
(1) TG (2) TC (3) HDL
공복 지방 섭취 후 공복 지방 섭취 후 공복 지방 섭취 후
1st 2nd 1st 2nd 1st 2nd 1st 2nd 1st 2nd 1st 2nd
임도연 0.113 0.111 0.128 0.127 0.262 - 0.201 - - - 0.235 0.234
박유숙 0.133 0.106 0.139 0.142 0.180 - 0.178 - 0.137 0.146 0.143 0.133
김남영 0.067 0.074 0.075 0.105 0.231 - 0.262 - 0.344 0.276 0.300 0.280
홍혜림 0.136 0.162 - - 0.260 - - - 0.192 0.218 - -
고렌나 0.112 0.123 - - 0.345 - - - 0.226 0.257 - -
▪ 측정량 결과
2) 임상영양과 식사요법, 김인숙 외 3명 공저, 도서출판 효일, p.175 지질수준의 분류
3) 임상화학실험, 김종호 외 4명, 고려의학, p.259, 지질
