단백질 종합실험

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    목차
    1. 단백질 표준곡선 작성

    (1) 실험결과
    (2) 표준곡선
    2. 단백질 농도측정과 LDH 활성측정

    3. DEAE 셀룰로스 이온교환 크로마토그래피에서의 LDH용출 양상

    4. 분리정제표
    5. 기질 포화곡선과 Lineweaver-Burk plot작성

    (1)폐에서 부분정제된 효소들의 활성측정
    (2) 포화곡선(Lineweaver-Burk plot)
    6. 에가로즈 젤 전기영동 후 활성염색 결과


    본문내용
    3. DEAE 셀룰로스 이온교환 크로마토그래피에서의 LDH용출 양상




    4. 분리정제표

    효소
    시료

    부피(ml)
    단백질
    농도
    (mg/ml)
    전체
    단백질양
    (mg)
    효소활성
    (mlU/l)
    전체
    효소활성
    (mlU)
    비활성
    (specific
    activity)
    정제
    배수
    쇄균액
    x10
    20
    6.138
    122.759
    19736.246
    394.725
    3.215
    1.000
    투석액
    x10
    2.3
    2.026
    4.660
    86452.023
    198.840
    42.673
    13.271
    DEAE-셀룰로스
    크로마토그래피

    2
    0.172
    0.344
    749.130
    1.498
    4.350
    1.353
    20mM
    1
    4
    0.218
    0.871
    8048.272
    32.193
    36.977
    11.500
    Tris-Cl 세척액
    2
    4
    0.192
    0.768
    55.374
    0.221
    0.288
    0.090

    3
    4
    0.227
    0.907
    139.970
    0.560
    0.617
    0.192

    4
    4
    0.197
    0.786
    123.503
    0.494
    0.628
    0.195

    5
    4
    0.225
    0.901
    145.782
    0.583
    0.647
    0.201
    0.06M
    1
    4
    0.210
    0.840
    126.409
    0.506
    0.602
    0.187
    NaCl 용출액
    2
    4
    0.297
    1.190
    144.813
    0.579
    0.487
    0.151

    3
    4
    0.236
    0.943
    135.127
    0.541
    0.573
    0.178

    4
    4
    0.216
    0.865
    191.308
    0.765
    0.885
    0.275

    5
    4
    0.188
    0.750
    151.594
    0.606
    0.808
    0.251
    0.12M
    1
    4
    0.216
    0.865
    139.001
    0.556
    0.643
    0.200
    NaCl 용출액
    2
    4
    0.198
    0.792
    120.597
    0.482
    0.609
    0.189

    3
    4
    0.174
    0.696
    139.001
    0.556
    0.799
    0.248

    4
    4
    0.197
    0.786
    127.377
    0.510
    0.648
    0.202

    5
    4
    0.198
    0.792
    111.879
    0.448
    0.565
    0.176
    0.2M
    1
    4
    0.237
    0.949
    126.409
    0.506
    0.533
    0.166
    NaCl 용출액
    2
    4
    0.213
    0.853
    127.377
    0.510
    0.598
    0.186

    3
    4
    0.198
    0.792
    152.562
    0.610
    0.770
    0.240

    4
    4
    0.182
    0.726
    137.064
    0.548
    0.755
    0.235

    5
    4
    0.201
    0.804
    127.377
    0.510
    0.633
    0.197