[화학 기기분석] PCR을 이용한 DNA 증폭

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레포트 > 공학계열
2012.03.21
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소개글

[화학 기기분석] PCR을 이용한 DNA 증폭에 대한 자료입니다.

1. 실험방법
1.1 시료의 전처리
1.2 PCR
1.3 전기영동
2. 결과해석 및 고찰

2-1. 정성분석
2-2. 정량분석
3. 결론

본문내용

1. 실험방법

1.1 시료의 전처리

(1) 팁(tip)에 template DNA를 소량 취한 후, 튜브 안쪽 벽에 묻힌다.

Figure 1-1. Template DNA.

(2) 마이크로 피펫을 이용하여 다음의 재료를 튜브에 넣고 잘 섞어준다.
- DI water 4.5μl
- {dNTP + buffer + enzyme(Taq)} 2% mix 7.5μl
- Primer F 1.5μl
- Primer R 1.5μl

Figure 1-2. (a) 마이크로 피펫 (b) DI water
(c) dNTP+buffer+enzyme mix (d) Primer F
(e) Primer R.

(3) 만들어진 시료에 라벨을 표시하고 잘 보관한다.

Figure 1-3. DNA Samples.

1.2 PCR

(1) 준비한 시료를 PCR에 장착한다.

Figure 1-4. DNA samples on PCR.

(2) 다음과 같이 PCR을 Programing한 후, PCR을 작동한다.
- Denaturation 94℃, 10sec / Annealing 60℃, 20sec / Elongation 72℃, 1min
(35 cycles)
- Elongation 72℃, 5min
1.3 전기영동

(1) 다음의 시료를 삼각 플라스크에 넣고 완전히 용해될 때까지 가열한다.
- Agarose 4 spoons
- 0.5% TAE(Tris Acetate EDTA) 30ml
- 물 1~3ml

#기기분석 #DNA #화학 #PCR #분석

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