[한방의학] 천마추출물의 성분분석 및 in vitro 생물활성에 관한 연구
![[한방의학] 천마추출물의 성분분석 및 in vitro 생물활성에 관한 연구-1](http://images.happyhaksul.com/thumb/69/68188-0001.gif)
![[한방의학] 천마추출물의 성분분석 및 in vitro 생물활성에 관한 연구-2](http://images.happyhaksul.com/thumb/69/68188-0002.gif)
![[한방의학] 천마추출물의 성분분석 및 in vitro 생물활성에 관한 연구-3](http://images.happyhaksul.com/thumb/69/68188-0003.gif)
![[한방의학] 천마추출물의 성분분석 및 in vitro 생물활성에 관한 연구-4](http://images.happyhaksul.com/thumb/69/68188-0004.gif)
![[한방의학] 천마추출물의 성분분석 및 in vitro 생물활성에 관한 연구-5](http://images.happyhaksul.com/thumb/69/68188-0005.gif)
분야
hwp♠당분해효소(α-glucosidase)활성저해능 실험
♠Angiotensin converting enzyme(ACE) 저해능 실험
♠결과 및 고찰
1. 일반성분 및 무기질 함량
2. 암세포 생육 저해능
3. 당분해 효소 활성 저해능
4. Angiotensin converting enzyme(ACE) 저해능
5. Gultathion S-transferase(GST) 활성
6. 적 요
각종 암세포에 대한 생육 저해활성의 검정은 SRB(sulforhodamine B) assay(Skehan et al., 1990)에 의하여 다음과 같이 수행하였다.
암 세포주는 인간의 간암세포인 Hep3B(hepatocellular carcinoma, human), 폐암세포인 A549(lung carcinoma, human), 유방암세포인 MCF7(brest adenocarcinoma, pleural effusion, human) 및 위암세포인 AGS(gastric carcinoma, human)을 ATCC로부터 분양받아 사용하였다. 또 시료의 세포독성을 알아보기 위하여 사람의 정상 간세포 WRL 68을 실험에 사용하였다. WRL 68, Hep3B, MCF7, AGS는 DMEM(Delbecco's modified eagle medium)을 사용하였고, A549는 RPMI 1640 배지에서 10% fetal bovine serum(FBS)으로 적응시켜 배양하였다. SRB assay는 실험 대상 세포를 4∼5×10⁴cell/㎖의 농도로 96well plate의 각 well에 100㎕씩 첨가하여 24시간 동안 배양(37℃, 5% CO₂)한 후, 각 시료 100㎕씩 첨가하여 48시간 배양하였다. 배양 후에 상등액을 제거하고, 냉각한 10%(w/v)의 TCA(trichloroacetic acid) 100㎕를 가하여 4℃에서 1시간 동안 방치하였다. 그 후 증류수로 세척하고 실온에서 plate를 건조한 다음, 각 well에 1%(v/v)의 acetic acid에 녹인 0.4%(w/v) SRB용액을 100㎕ 첨가하고 상온에서 30분 동안 염색시켰다. 결합되지 않은 SRB 염색액은 1%의 acetic acid로 세척하여 건조하고 10mM의 Tris buffer 용액 100㎕를 첨가하여 염색액을 녹인 다음, 540 nm에서 microplate reader를 이용하여 흡광도를 측정하여 천마추출물의 암세포 및 정상세포에 대한 생육저해능을 검토하였다.
