glycinate ion이 sample buffer와 stacking gel 속에 도달하면 pH가 낮아져(pH 6.8) 평형이 zwitterion을 형성하는 방향으로 이동된다. sample과 stacking gel을 통한 mobile ion이 결핍됨으로써 current flow가 감소하게 된다. 따라서 일정한 전류를 유지하기 위하여 chloride ion과 glycine ion 사이에 high localized voltage gradient가 형성되어 SD
2. Method
[실험재료]
premix, template & primer, D.W, mineral oil, thermocycler(PCR기계), Seakem LE agarose, gel caster, 1×TAE, EtBr, 마이크로피펫, 1.5㎖ tube
[실험방법]
① premix가 들어있는 20㎕ tube에 template DNA 1㎕, primer 2㎕를 D.W 17㎕를 넣고 잘 섞기 위해 vortexing 해준다.
② 적당하게 centrifuge 해준다.
- vortexing 시에 위로
전기영동(agarose gel electrophoresis)에 의한 유전자의 분리
a. Agarose gel 전기영동 시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들로는 DNA의 분자의 크기, Agarose의 농도, DNA 형태에 따라 이동속도가 다르다. 또 전압이 높을수록 전기장의 방향, Ethidium bromide, 전기영동 buffer의 성분과 이온의 강도도 전기영동 속도에 영향을
DNA를 loading하게 되면 크기와 무게, 모양에 따라서 많이 이동할 수도, 적게 이동할 수 있다. 이 차이를 가지고 어느 band가 어떤 물질을 가지고 있는지를 확인할 수 있다.
① Agarose gel 전기영동 시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들
a. DNA분자의 크기가 클수록 느리게 이동한다.
b. Agarose의 농도가 높을수록
일반생물학및실험 Report 2020 November 01
생물학실험 Report
의생명공학과
Ⅰ. 기본정보
실험 제목: DNA Gel electrophoresis
실험 목적: 플라스미드 DNA와 PCR 생산물을 전기영동을 통해 확인하는 실험실험자: antler11
Ⅱ. 서론 (Introduction)
1. PCR (polymerase chain reaction)
PCR(polymerase chain reaction)은 1983년, K.B.Mullis가 고