10장. 유전자와 유전체의 분석 (세포생물학)
분야
hwp1.1 제한효소는 DNA 분자의 특정부위를 절단한다.
∙핵산분해효소: 어떤 특정 뉴클레오티드 서열에서만 DNA를 절단. 핵산에서 인산디에스테르결합의 가수분해를 촉매
∙제한효소: 특정부위에서 이중나선 DNA 상의 짧은 염기쌍서열을 인지하고 절단. 박테리아의 종 사이에서 DNA를 제한적으로 절단
- 종류가 다른 박테리아는 각각 다른 제한효소를 가짐. 제한효소는 서로 다른 특이적인 염기서열을 가진 뉴클레오티드를 절단. 표적서열은 일반적으로 4~8 뉴클레오티드 쌍 길이
1.2 전기영동법은 DNA 절편을 크기별로 분리한다.
∙제한효소를 이용해서 큰 DNA 분자를 작은 조각으로 절단한 다음, DNA 조각을 분리 → DNA 조각 혼합물을 아가로스나 폴리아크릴아미드 겔 판의 한쪽 끝에 올려 놓음 → 겔 판 양쪽에 전압을 걸면 DNA는 음전하를 띠기 때문에 DNA 조각은 양극을 향해 이동 → DNA 조각은 크기에 따라 겔 판에서 분리 → DNA 밴드가 든 아가로스 조각을 잘라내어 DNA 추출
∙DNA를 염색하여 관찰
- 방법: (1) 자외선 아래서 형광을 발하는 염색물질에 노출, (2) 방사성동위원소 표지
