분야
docⅡ. 본론
1. Lowry method
- 원리
- 시약 및 기재
- 방법
- 다른 method와의 차이점
- 참고) 뷰렛 시험 (biuret test)
2. Bredford method
- 시약 및 재료
- 방법
- 다른 method와의 차이점
3. BCA method
- 방법
- 다른 method와의 차이점
* 참고문헌
생명체로부터 나온 다양한 표본들의 단백질 농도를 알아내고 싶지만, 그러한 정량 분석은 간단하지 않다. 세포 추출물은 보통 분자량이 다른 수많은 단백질 분자들이 포함되어 있는 복잡한 혼합물이므로, 단백질의 농도를 몰 단위로 나타낼 수는 없다. 또한, 세포 내에서 발견된 수많은 단백질들의 화학적 특성을 살펴보면, 반응성이 적은 펩타이드 골격이 반복된 것 외에는 정밀한 화학분석에 쉽게 이용될 만한 공통적인 화학적 특성이 거의 없다. 단백질의 화학적 성질은 아미노산 조성에 따라 달라진다. 예를 들어, 방향족 작용기, 수산기, 기타 작용기 등의 존재 유무라든가 질소화 황의 함량 같은 것이 중요하다.
Ⅱ. 본론
1. Lowry method
- 원리
모두 구리이온(cupric ion-Cu2+ 과 cupurous ion- Cu+)을 이용하는 방법이다. Folin 시약(Lowry 방법)과 BCA시약은 발색반응을 위해 cupric ion에서 cupurous ion으로 환원반응이 일어 나야 한다. 이들시약은 단백질 양에 비례하여 형성된 cupurousion과 단백질의 복합체를 형성하고 그 발색정도가 단백질 농도에 비례하여 정량이 가능하다. 이들 구리이온의 화학변화에 영향을 주는 화합물이 검체에 존재할 경우 단백질 정량을 간섭하게 되는데 이들은 분석을 실시하기 전에 제거하거나 영향을 주지 않을 정도로 희석하여 분석을 실시한다. Lowry 방법은 전통적으로 간섭인자가 많은 것으로 알려져 있었다.
- 김승호, 개정 단백질 실험노트, 월드사이언스, 2004 ,p38~40
- 곽한식 외 7, 생화학, 라이프사이언스, 2006, p.50
- www.naver.com
