실험보고서 Plasmid 분리 실험 & Agarose gel을 이용한 plasmid 전기영동
분야
hwpE.coli를 배양해 플라스미드를 분리하고, 분리한 플라스미드를 직접 만든 Agarose gel을 이용하여 전기 영동한다.
2. Introduction
● Plasmid DNA 분리의 원리
주로 mini-prep이라고 부르는 이 방법은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법이다. 가장 보편적으로 사용되는 방법인 Alkali lysis method이다. 기본적인 원리는 그림에서 보듯이 세균의 cell wall과 cell membrane을 부수고 DNA 만을 분리하는 것이다. 이 때 중요한 것은 세균이 원래 가지고 있는 chromosomal DNA와 plasmid DNA를 구분하여 분리하는 것이다. 이 둘은 모두 DNA이므로 성질이 비슷하기 때문에 구분하여 분리하기가 쉽지 않다. 다행히 chromosomal DNA는 분리 과정에서 linear 형태가 되고 크기가 상당히 크기 때문에 이런 성질의 차이를 이용하면 분리할 수 있다. Alkali lysis method 의 핵심 원리는 다음과 같다.
Brock의 미생물학 제 11판 - 월드사이언스
출처 : http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_20.php
