![[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot-1](http://images.happyhaksul.com/thumb/773/772037-0001.gif)
![[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot-2](http://images.happyhaksul.com/thumb/773/772037-0002.gif)
![[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot-3](http://images.happyhaksul.com/thumb/773/772037-0003.gif)
![[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot-4](http://images.happyhaksul.com/thumb/773/772037-0004.gif)
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![[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot-6](http://images.happyhaksul.com/thumb/773/772037-0006.gif)
![[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot-7](http://images.happyhaksul.com/thumb/773/772037-0007.gif)
![[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot-8](http://images.happyhaksul.com/thumb/773/772037-0008.gif)
![[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot-9](http://images.happyhaksul.com/thumb/773/772037-0009.gif)
![[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot-10](http://images.happyhaksul.com/thumb/773/772037-0010.gif)
![[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot-11](http://images.happyhaksul.com/thumb/773/772037-0011.gif)
![[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot-12](http://images.happyhaksul.com/thumb/773/772037-0012.gif)
분야
hwp2. 실험 목적
: BCA Method를 이용하여 우유 중의 단백질 함량을 분석하고 SDS-PAGE와 Coomassie Blue 염색을 통해 단백질의 전기영동 결과를 관찰한 것을 바탕으로 Western Blot을 시행하여 membrane에 transfer시켜, 항원-항체 반응을 이용하여 특정한 단백질의 정량 분석과 검출하는 방법을 실험을 통해 숙지한다.
3. 이론
Ⅰ. 단백질 정량법
1) BCA(Bicinchoninic Acid) 법
- 단백질이 구리 이온(Cu2+, Cu1+)을 환원 (Reduction) 시킬 수 있는 성질을 이용
Fig 1. BCA 원리 모식도
- 단백질에 의해 환원된 구리 이온은 BCA용액과 반응을 해서 보라 빛의 화합물을 생성
- 이 화합물은 빛의 특정 영역(562nm)에서 구리 이온이 담긴 용액과 BCA용액 각각보다 빛의 흡수율이 높기에, spectrophotometer를 사용해서 측정하면 흡수율 차이를 측정할 수 있다.
- 단백질의 양이 많으면 보다 많은 보라빛 화합물이 생성 → 그 화합물은 빛을 더 많이 흡수. 즉 흡수율이 증가 → 그것에 비례해서 Sample에 있는 단백질 양을 결정
http://biotechnology.tistory.com/21
http://blog.naver.com/redplatypus/40001508802
http://blog.naver.com/shung78/130031545514
http://www.elpisbio.com/sub/support/protocols/SDS-PAGE-gel.htm
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=431735&cid=42411&categoryId=42411
http://en.wikipedia.org/wiki/Glycine
http://100.naver.com/100.nhn?docid=828536 (monoclonal/polyclonal antibody)
http://en.wikipedia.org/wiki/Nitrocellulose
http://en.wikipedia.org/wiki/Polysorbate_20
http://en.wikipedia.org/wiki/Horseradish_peroxidase
정지은, Tech Note-Western blot, 서린바이오사이언스, 2012, pp. 1-11
이승택, 2013-1 단백질 정량 강의자료, 연세대학교 생화학과, 2013, pp.1-16.
