미국의 요크타운 테크놀로지社에서 특허권을 사들여 글로피쉬(GloFish)라는 이름을 붙여 2003년 관상용으로 미국에 판매하기에 이르렀습니다. ▲ 유전자변형물고기 GloFish
GMO란?
GMO[genetically modified organisms]
유전자 변형 농산물
인위적으로 유전자를 조작하여 사용
Plasmid 라는 DNA를 통해 조작
Plasmid)라 불리는, 세포 안팎을 자유로이 왕래할 수 있는 유전자에 삽입하고자 하는 다른 유전자를 간단하게 이음으로써 인위적인 유전자 조작이 가능해졌다. 식물의 경우는 식물에 감염하는 세포의 플라스미드에 목적하는 유전자를 삽입하여 감염시키면, 그 유전자가 식물에 삽입되어 새로운 성질을
plasmid의 확인
DNA 단편의 정제 → gel elution
단편해석(base sequencing)
Southern & Northern blot 해석
Agarose gel로부터 DNA fragment를 자른다.
2. 1.5ml microcentrifuge tube 에 gel slice를 넣어 무게를 재고 QG buffer를 gel 무게의 3배만큼 첨가.
3. 50도에서 10min incubate, incubation 동안 매 2~3분마다 vortexing 하면서 mix
4. Sampl
Ⅱ. 세균의 분류
1) 모양에 의한 분류
현미경을 이용한 모양으로는 구균(cocci), 간균(bacilli), 나선균(spiral forms), filamentous 등이 있다. 염색법으로는 Gram staining, acid fast staining, flagella staining, capsule staining, endospore staining 방법이 있다.
2) 유전학적인 분류
DNA homology, rRNA sequence homology, plasmid, ....
Ⅳ. 세
1.실험 목적
- 분리한 plasmid DNA를 제한효소로 처리하고, 전기 영동법과 PCR을 이용하여
DNA를 분리하고 확인하는 기술을 습득한다. 제한효소의 종류에 따른 절단 방식을
알아본다.
2. 실험 원리
1) 제한 효소 (Restriction enzyme)
(1) 제한 효소의 정의
* 제
● host(숙주)와 vector(매개체) system
1.host: 세포내에서 재조합 DNA를 증식하기 위한 생물체로서
E. coli ,포유류 조직배양세포, 효모, 곤충세포 등이 있다.
2.vector: host안으로 들어가서 복제 할 수 있는 매개체.
흔히 이용되는 것으로 다음과 같이 있다.
①plasmids:세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재
Plasmid, virus, transposon 등을 통하여 병원성 유전자가 비병원성균에 들어 가면
비병원성균이 병원성 균으로 변함 (quantum jump).
병원성 유전자 자체가 숙주로 직접 들어가거나 숙주DNA의 일부가 되기도 함
( Aids virus, Agrobacterium )
◆ 비병원성균의 비병원성균으로의 변이 : 돌연변이, 유전자 재
다 분해되면 inhibitor가 다시 붙어 유전자는 turn off 된다.
따라서 LacZ 부분을 plasmid에 삽입하여 이러한 유전자 조절 기구를 실험에 이용하는데, 이 때 LacZ operon의 동작 여부를 확인하기 위해서 IPTG와 X-Gal을 사용한다. IPTG는 LacZ gene inducer 역할을 하여, Lactose 대신 inhibitor와 결합하지만 분해되지는 않는다.
nucleotide.
⑷ Taq polymerase : 유전자 합성효소. 효소이지만 열에 강하다.
5. PCR 반응 각 성분에 대해 고려할 점
⑴ Template DNA
선택하여 증폭하고자 하는 target DNA 단편을 가리키는 용어로서 세포내의 chromosomal DNA나 전염성 병원체의 DNA 또는 RNA로부터 제조한 complementary DNA(cDNA), plasmid DNA 등을 쓸 수 있다.