전기영동과 그 목적
전기영동
단백질의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에
사용하는 방법 -> 단백질의 정성적인 분석
SDS-PAGE ( Sodium Dodecyl Sulphate
Polyacrylamide Gel Electrophoresis )
: SDS와 Polyacrylamide 를 사용한 전기영동전기영동의 목적
원하는 단백질의 유
단백질의 전기영동(SDS-PAGE)
단백질이나 핵산 등의 고분자물질은 하전을 띄므로 이를 기초로 하여 이들 분자를 전기장을 띤 매질(겔)에서 이동 분리시켜 이들의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 방법을 전기영동(electrophoresis)라 한다. 특히 단백질의 경우는 SDS (sodium dodecyl sulfate)를 포함한 SDS-P
전기영동의 이동도, μ는 전위에 대한 입자의 속도, V의 비가 된다. 전기영동의 이동도는 또한 분자의 실 전하, Z를 마찰계수, f로 나눈 것과 같다. 즉,
전기영동의 과정 중의 겔 상태에서의 단백질의 이동은 단백질의 크기와 모양에 의해 결정된다.
SDS-PAGE (SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis)
폴리아크릴아
평판(slab)에서 동시에 여러 시료와 표준 물질을 분석 할 수 있는 기법.
Gel의 세공 크기를 조절하여 하전된 물질의 이동속도 결정.
대표적 Gel 물질: Agarose & Polyacrylamide.
Polyacrylamide 농도:3~20% 가능
단백질은 SDS와 polyacrylamide 전기영동(SDS-PAGE)→ 분자량에 따른 분리
PCR 산물의 확인
정제
SDS-PAG
SDS-PAGE, sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis는 생화학과 유전학 및 분자 생물학에 이용되는 단백질 분리 기술로, 그들의 전기영동 이동성(polypeptide chain의 길이 또는 분자량 뿐만 아니라 Protein folding, Posttranslational modification과 다른 인자들에 의한)을 이용한 기술이다.
1) SDS-PAGE에서 단백