시판되는 agarose는 완전히 순수 분리된 것은 아니며 다른 다당류나, 염, 단백질 등이 혼합되어 있으며, 이런 물질들이 포함된 정도에 따라 전기영동시 DNA가 이동되는 정도나 DNA가 gel에서 분리되는 정도가 달라진다. 따라서 효소 억제제와 nuclease가 함유되어 있지 않으며 ethidium bromide로 염색할 경우 형광
평판(slab)에서 동시에 여러 시료와 표준 물질을 분석 할 수 있는 기법.
Gel의 세공 크기를 조절하여 하전된 물질의 이동속도 결정.
대표적 Gel 물질: Agarose & Polyacrylamide.
Polyacrylamide 농도:3~20% 가능
단백질은 SDS와 polyacrylamide 전기영동(SDS-PAGE)→ 분자량에 따른 분리
PCR 산물의 확인
정제
1R-1. 올바른 micropippette 사용법에 대해서 설명하라.
-micropippette의 기본적인 설명
: micropippette의 용량의 단위는 microliter 이다. 용량은 micropippette 손잡이에 붙어있는 라벨로 알 수 있다.
그림 일반적으로 많이 사용하는 네 가지
종류의 micropippette
사진에서 왼쪽으로부터 1000 microliter (이것만 파란색
전기영동(agarose gel electrophoresis)에 의한 유전자의 분리
a. Agarose gel전기영동 시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들로는 DNA의 분자의 크기, Agarose의 농도, DNA 형태에 따라 이동속도가 다르다. 또 전압이 높을수록 전기장의 방향, Ethidium bromide, 전기영동 buffer의 성분과 이온의 강도도 전기영동 속도에 영향을
agarose gel)
(1) 기본원리
DNA gel전기영동 방법은 DNA를 크기에 따라서 분리하는 방법이다. DNA는 backbone의 phosphate group 때문에 전기영동에 사용되는 buffer에서 음전하를 띄고 있으며 두 전극 사이에 위치했을 때 양극 쪽으로 움직이게 되는 기본원리를 갖는다. 이때 DNA분자가 gel matrix사이를 통과하는 속도