Day 1 - 제한효소를 이용한 DNA 절단 및 분석, Ligation
3.1.1. Digestion of DNA with Restriction Enzyme
I. Apparatus
- Water bath, brief centrifuge
II. Reagents
- Plasmid, DDW, restriction enzymes [NdeI, BamHI], restriction enzyme reaction buffer
① NdeI: an endonuclease isolated from Neisseria denitrificans. In molecular biology, it is commonly used as a restriction enzyme.
I.
1. 문제 제시
35세의 젊은 여자가 2개월 전부터 팔 다리 부종이 나타나고, 전부터 있던 호흡곤란이 악화되어 내원하였다. 1달 전부터 손, 발 피부에 검은 자반이 생겼다고 한다.
2. 단서 인식
- 35세 젊은 여자
- 2달 전부터 팔 다리 부종
- 전부터 있던 호흡곤란 악화
- 1달 전부터 손 발 피부에
Who is interested in the process?
Alongside traditional methods of processing and preserving food, the technology of food irradiation is gaining more and more attention around the world. Although regarded as a new technology by some individuals, research on food irradiation dates back to the turn of the century with the first USA and British patents being issued in 1905 for the use of ionizing
4. Bradford Assay
- Bradford Reagent는 95% ethanol, 88% phosphoric acid, Brilliant Blue G로 이루어져 있다. Ethanol은 유기용매이기 때문에 coomassie blue를 Bradford reagent 내에 잘 용해 시키고, phosphoric acid는 reagent가 산성 조건을 충족시키게 한다. 산성 조건 하에서 Coomassie blue는 doubly-protonated red form이 되기 때문에 6개의 phenyl grou
DNA와 같이 전기영동 될 때 DNA가 움직인 정도를 알 수 있게 하는 역할을 한다.
3) Electrophoresis buffer
TAE(Tris-acetate EDTA): DNA분자량이 큰 경우, agarose electrophoresis에서 쓴다.
TBE(Tris-borate EDTA): DNA분자량이 작은 경우, DNA sequencing에 쓰인다.
3. Reagents
Agarose, TAE buffer, etidium bromide, DNA ladder, DNA loading buffer
4. Apparatu