만들어내는 무기호흡을 한다. 우리가 실험을 진행한 발효는 무기호흡으로 미생물들이 산소 대신 자신이 가지고 있는 효소를 이용해 Ethanol을 생산해내는 에탄올 발효 실험이었다. 이번 실험에서는 에탄올 발효의 전반적인 과정을 이해하고, 세포의 증식정도를 OD와 HPLC분석을 통해 확인해보았다.
1. 이론및 원리
1.1. 크로마토그래피
1.1.1. 크로마토그래피의 정의 1-[1]
크로마토그래피(chromatography)란 다공성 흡착제 입자를 일정한 길이만큼 충전시킨 관(column)에 용질이 들어 있는 혼합물을 통과시켜 흡착제 입자에 대한 용질의 흡착 특성 차이에 근거하여 분리하는 방법이다. 즉, 시간이 지나
6. 분석법
1 유지의 tocopherol 측정
- HPLC : 전처리가 필요 없이 칼럼에 넣고 분석
α,β,γ,δ토코페롤 분석이 가능하며 정확도가 가장 우수함에 따라 제일 많이 사용되고 있다. 유지류는 잔처리가 필요없으나 시료에 따라 잔처리나 precolumn을 필요로 하는 경우가 있다.
2 산화정도 측정
- 비색법
TBA(thiob
HPLC용 용매를, 물은 초순수(저항값 18.3MΩ 이상)을 사용하는 것이 좋다.
2) 용매 전달 장치 (PUMP)
용매 저장 용기에서 용매를 흡입하여 시료 주입기에서 검출기에 이르는 전 기기 부분에 밀어 주는 역할을 한다.
- 안정하고 재현성 있는 흐름.
- 펌프 내부는 용매와의 화학적 상호 반응이 없어야 한다.
실험방법
(1) 증류
(2) GC
① 표준원액은 각각 500㎕를 취하여 희석용액(ethanol:H2O=1:1 v/v)으로 10.0㎕로 한 후 내부표준용액 100㎕를 첨가
(내부표준용액은 n-butanol 5.0ml를 취하여 희석용액으로 100.0ml를 첨가)
② 표준용액 및 시험용액 각각 2.0㎕를 GC에 주입한 후 크로마터그람에 나타난 피크면적을 내