➀ 세포벽
→ 세포벽은 모든 진핵세포에 있는 것은 아니며
세포벽이 있는 경우에는 세포벽은 원핵세포보다 화학적으로 단순하고, 펩티도글리칸 (peptidoglycan)이 없다
➁ 세포막
→ 막단백질이 다르며
세포간 인식에 중요한 역할을 하고 세균 부착부위로 제공되는 당질을 함유하고
삼투적
이번 실험에서는 그람 염색법을 사용하였다. 그람 염색법에 의해 세포는 세포벽의 구성이 서로 다른 두 가지의 그룹, 즉 그람 양성균과 그람 음성균으로 나뉘어 진다. 그람 양성균은 Staphylococcus, Streptococcus 등이 있는데, plasma membrane 바깥쪽에 두꺼운 세포벽을 가지고 있으며, 그 세포벽은 peptidoglycan
peptidoglycan 층이 두껍고 teichoic acid의 양이 많기 때문에 탈색제인 알코올에 의해 영향을 받지 않아 보라색을 유지하지만 그람 음성 세균은 세포벽이 단일 peptidoglycan 층이 비대칭 리포다당질-인지질 이중막과 단백질로 이루어진 외막 아래에 붙어 있기 때문에 외막이 알코올에 의해 손상을 받으면 crystal vi
의하여 결정된다. 그람양성균은 20~28 정도의 두꺼운 peptidoglycan층을 지니고 있고, 그람음성세균은 2~7 정도의 그람양성균에 비하여 얇은 peptidoglycan층을 지니고 있으며 지질(lipid)을 함유한 층을 바깥쪽에 지니고 있다. 따라서 이런 세포벽 구성 성분의 차이에 의해 세균들은 두 그룹으로 구분될 수 있다.
√ 면역증강물질
선천성 면역은 미생물 산물, 예를 들어 LPS, glucan, peptidoglycan 등이
세균이나 곰팡이의 세포벽, 세균성 DNA(CpG)등을 이물질로 인식할 수 있
게 진화되어왔고 이런 물질들을 투여함으로써 선천성 면역반응인
즉, 비특이적인 면역 반응을 증강시키는데 이용하여 왔다. 그 대표적인 예
때 나타나는 색깔 차이로 균의 특성을 Gram 양성(purple 또는 blue) 또는 음성(pink 또는 red)으로 나타낼 수 있다. 이러한 그람염색 원리에 의해 세균은 세포벽 구성성분에서 두꺼운 peptidoglycan층(20~28μm)을 갖는 그람양성균과 얇은 peptidoglycanc층(2~7μm) 바깥에 지질층을 갖는 그람음성균 두 그룹으로 구분된다.
막 모양의 물질이 보이는 경우가 있다.
- 세포벽에 펩티도글리칸(peptidoglycan)을 가 지고 있으며 세포 안쪽에는 세포막이 있다.
- 56℃의 가열로 단시간에 사멸하며 37℃에서도 단시간 내에 불활화 한다.
알코올, 페놀, 포르말린 등에서 쉽게 사멸되며 -60℃~-80℃에서는 장기간 보존할 수 있다.
Keeping size and shape of cell
Preventing rupture of cells
by osmotic pressure
Hard because of Peptidoglycan
- 20 ~ 80mm : gram-positive
- 7 ~ 8 mm : gram-negative
24hours cultured
E.Coli in medium
Crystal violet
Gram iodine
95% ethyl-alcohol
Safranin solution
(25% safranin in 50% ethyl-alcohol)
Wash th
peptidoglycan, murein)
- 격자를 형성하는 폴리펩티드가 부착된 이당류가 반복되는 구성
- 펩티도글리칸은 하나의 거대한 공유결합 분자이며, 여러 겹의 사슬이 연결된 울타리와 비슷하다.
- 이당류 구성성분
→ N-acetyleglucosamine(NAG)와 N-acetylemuramic acid(NAM)
→ 반복되는 이당류(NAG-NAM)는 10~65분자가 여러줄로
2) 원리
Gram positive bacteria와 Gram negative bacteria는 cell membrane의 구성에 큰 차이가 있다. 그 중 Gram staining에 영향을 주는 peptidoglycan층의 두께가 Gram positive bacteria가 훨씬 두꺼워 위의 Gram staining 단계에서 crytal violet-iodine의 decolorization이 일어나지 못해 Gram +는 purple, Gram -는 red을 띄게 된다.
But, 오래된