바이러스학 실험 결과보고서 RT-PCR
분야
hwp2. Objective
3. Principle
4. Method
5. Result
6. Discussion
7. References
2. Objective : poliovirus의 RNA를 RT-PCR을 이용해 cDNA로 만든 뒤, PCR을 이용해 증폭시킨 후 전기 영동하여 크기를 관찰한다.
3. Principle : poliovirus의 RNA에 특이적으로 결합하는 프라이머를 이용하여 poliovirus의 cDNA만을 만들 수 있으며 전기영동으로 밴드를 관찰한다.
4. Method
1) RT-PCR : cDNA생성
RT-PCR은 혼합시킨 premix를 사용. premix에는 taq pol, dNTP, PCR 최적의 buffer가 들어가 있다. premix와 RNA 주형을 5ul, primer 3ul, RNA free water 13ul를 넣어준다.
① 72℃에서 5분
② 42℃에서 60분
③ 94℃에서 5분간
(중략)
6. Discussion
중합효소와 연쇄반응법과 역전사효소 반응을 혼합한 RT-PCR(reverse transcriptase -polymerase chain reaction)법은 세포에서 추출한 mRNA에서 cDNA를 합성하고 이것을 주형으로 하여 PCR로 증폭한 후 분석하는 기술이다. 이 방법으로 mRNA 종류를 확인하고 유전자 발현 수준을 알아낼 수 있다.
(중략)
주우동 외 7인/ 미생물 유전학/ 월드사이언스/ P. 83~85
남상욱 외 2인/ 유전공학의 이해/ 라이프 사이언스/ p.126,127
RT-PCR 실험은 poliovirus의 RNA를 RT-PCR을 이용해 cDNA로 만든 뒤, PCR을 이용해 증폭시킨 후 전기 영동하여 크기를 관찰하는 실험입니다.
본문내용은 실험 목표, 원리, 결과사진, 실험 방법에 대한 자세한 설명과 원리(PCR 온도조정 이유 등)등을 포함하고 있습니다.
