[실험기기 분석] TLC와 HPLC 실험

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레포트 > 공학계열
2013.03.20
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소개글

[실험기기 분석] TLC와 HPLC 실험에 대한 자료입니다.

1. TLC를 이용한 성분 물질 분석
2. HPLC를 이용한 성분 물질 분석

본문내용

1. TLC를 이용한 성분 물질 분석
1) TLC란
- 종이크로마토그래피와 같은 목적으로 사용한다. 흡착제로는 사용목적에 따라 실리카겔,
산화알루미늄, 섬유소말, 이온교환 셀룰로오스 등이 쓰인다.
이 방법은 종이크로마트그래피에 비해 전개시간이 짧고, 분리 능률이 양호하며, 강한
산, 염기나 강렬한 시약등을 발색시약으로 사용할 수 있는 특징을 지니고 있다. 유기
화합물의 분리, 정제, 정량, 순도 검정반응이나 대사과정의 추적, 무기이온분석 등
응용범위가 넓다. TLC는 매우 손쉽고 빠르게 할 수 이TDj서 혼합물 조성의 1차적인
분석방법으로 주로 사용되고 있다. 또한 관 크로마트그래피를 위한 최적의 elution
solvent를 찾는데도 유용하게 사용되며 특히 아주 적은 양으로도 분석할 수 있는 점이
장점이다.
- TLC는 이 물질이 동일 물질인지를 쉽고 빠르게 알 수 있는 분석방법이다. TLC의
고정상은 silica or alumina 같은 흡착물질이다. 고정상에 적당한 용매를 흘려준 후
TLC기판에 spotting된 물질은 이동상인 용매와 고정상인 흡착물질에 의해 경쟁이
일어나서 물질이 분리가 된다. 샘플은 이동상의 용해도와 고정상의 흡착정도가 달라서
물질이 이동이 된다. 이동거리는 고정상과 이동사엥 따라 물질마다 고유한 값을
갖는다. 이런 변화는 이동상에 의해 조절된다. 특정한 실험조건에서 화합물의 이동성은
RF값으로 정량적으로 표현된다.

※ RF값 - 각 물질마다 특정한 용매조성에서 얼마나 멀리 이동한가를 나타낸다.
이 값이 근접하거나 같으면 이 물질이 동일한 물질임을 알 수 있는
지표이다. RF는 용질이 이동한 거리를 용매가 이동한 거리로 나눈 값으로
정의한다.

- 전개방법: TLC에서는 상승식 전개법을 쓴다. 즉, 점적한 TLC판을 전개통(왼쪽 그림 참조) 속에 거의 수직 방향으로 세워둔다.전개통 속이 용매의 증기로 포화되도록 작은 전개통을 사용하고, 또 전개통 안쪽 3면에 전개 용매를 충분히 흡수한 거름종이로 휘장을 친다. TLC의 경우에도 이미 확인된 대조 물질을 함께 전개시킨다.

2) TLC를 이용한 실험
(1) 준비물
■ 시약
- mobile phase(Benzene, Hexane, 2-propanol, Acetone),
- sample(phenol 11.37M, phenoxy ethanol 7.98M, naphthalene 0.05g/ml,
3.4-Dichloronitrobenzen 0.05g/ml, 분발하고자 하는 혼합 샘플)

■ 실험에 사용한 기구: TLC판, 파이펫, 팁, 핀셋, UV램프, 챔버, 자, 연필, 마스크,
와이퍼, 네임펜, 오일글래스커터

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